Abstract

MUNOZ, Rodrigo  and  ALFARO, Wilbert. Estandarización de la técnica de reducción del NBT mediante lectura en placas de microELISA. Rev. méd. Hosp. Nac. Niños (Costa Rica) [online]. 2000, vol.35, n.1-2, pp.29-39. ISSN 1017-8546.

La enfermedad granulomatosa crónica (EGC), es un padecimiento en el cual las células fagocíticas se ven imposibilitadas de producir sustancias microbicidas por las vías dependientes del oxígeno. Esta anormalidad puede evaluarse en el laboratorio haciendo uso de la prueba del nitroazul de tetrazolio (NBT), el cual es afectado directamente por la cantidad de superóxido producido y liberado en el fagolisosoma. Existen muchos y diversos protocolos a seguir a la hora de llevar a cabo dicho análisis. Aquí se describe la estandarización de un método simple, donde el formazán producto de la reducción del NBT es solubilizado con ayuda de KOH y dimetilsulfóxido (DMSO), determinándose la densidad óptica de la disolución resultante en un lector de placas para microELISA. La técnica logra simplificar y agilizar el estudio de pacientes sospechosos de EGC que acudan al Hospital Nacional de Niños, debido a que permite incluir un mayor número de muestras por análisis, además permite cuantificar el NBT reducido por interpelación en una curva de calibración tipo Lambert y Beer.