Al igual que en Costa Rica, en otros países se ha extendido la demanda para la comercialización de fauna, sobresaliendo el interés por los insectos. Este grupo de artrópodos tiene un alto valor en fines de exhibición, investigación, y como fuente de alimento alternativo (^{Van Huis et al., 2013}; ^{von Hackewitz, 2018}). Una de las principales razones que ha llevado al aumento en la demanda en insectos es el valor nutricional elevado, con proteínas que, en general, se pueden calificar como de buena calidad (^{DeFoliart, 1997}; Van Huis et al., 2013). Además, el alto crecimiento poblacional humano incrementa a su vez la demanda de alimentos a escala mundial, especialmente las fuentes de proteínas. La producción de harina de pescado, soya y cereales, debe intensificarse, y complementarse mediante el uso de fuentes alternativas (^{Rumpold & Schlüter, 2013}; ^{Apolo-Arévalo & Lannacone, 2015}). Los insectos pueden llegar a superar la calidad proteínica de la que proporcionan el pescado, el pollo y cualquier otra fuente. Resulta cada vez más llamativo y quizás viable, el considerar la producción de insectos como el futuro en la producción alimenticia (Van Huis et al., 2013).

Ya están descritos y probados los elementos que hacen viable la producción de insectos para alimento, las consideraciones ecológicas de importar insectos a un país deben ser igual de importantes. Para los gobiernos es fundamental evitar efectos negativos en los ecosistemas nativos (^{Fiaboe et al., 2012}). En esta línea, los insectos han tenido un papel preponderante, pues incentivaron el desarrollo de políticas de control internacional (^{Rumpold & Schlüter, 2013}). En este punto, debe notarse que las primeras iniciativas de control fronterizo sobre especies invasoras emergieron como respuesta a insectos plaga que causaron un enorme perjuicio al sector productivo de Europa y Norteamérica. A mediados del siglo XIX la presencia de la filoxera de la vid (Daktulosphaira vitifoliae) en Europa causó la destrucción de gran parte de los viñedos europeos (Rumpold & Schlüter, 2013).

Por lo tanto, comprender el potencial invasor de una especie termina siendo un requisito antes de lograr importarla. Ortópteros (grillos y saltamontes) son un orden de insectos donde se han centrado investigaciones que buscan comprender el potencial de dispersión. Un caso reciente es el del grillo japonés enterrador Velarifictorus micado, introducido al este de los Estados Unidos en 1959; ^{Bowles (2018}) indica un aumento en su ámbito de distribución, incluyendo parte del norte del país. De manera interesante, él recalca la incidencia de la especie cerca de asentamientos humanos, con pocos ejemplares hallándose en zonas remotas, sugiriendo un bajo o nulo impacto en los ecosistemas.

Una especie que se encuentra actualmente distribuida a nivel mundial es el grillo doméstico Acheta domesticus (Gryllidae). Esta especie se ha comercializado, para usarse como alimento de animales en condiciones de cautiverio, incluyendo herpetofauna y arácnidos (^{Pino-Moreno et al., 2014}; ^{Arias et al., 2016}; ^{Quirós-Blanco et al., 2019}). También, la implementación de proyectos de aprovechamiento de grillos para producción de harina, se ha intensificado, buscando complementar o reemplazar la producción de harina de pescado o soya (^{Parajulee et al., 1993}; ^{Santurino et al., 2016}; ^{von Hackewitz, 2018}).

A. domesticus es una especie con metamorfosis incompleta, consta de huevo, ninfa y adulto. Dentro de las 24 a 48 horas posteriores al apareamiento, las hembras de los grillos ponen sus huevos en un área húmeda y con buen sustrato. A una temperatura óptima, los huevos eclosionarán después de 11 a 15 días y comenzarán el ciclo como ninfas nuevamente (^{Roe et al., 1985}; ^{Apolo-Arévalo & Lannacone, 2015}; ^{von Hackewitz, 2018}). El ciclo de vida rápido, permite contar con ejemplares reproductores en cuestión de semanas y su reproducción constante facilita alcanzar números significativamente productivos (^{Van Huis et al., 2013}). La especie ya ha sido identificada como introducida en Costa Rica (importada de forma no legal posiblemente) para ser utilizada como alimento vivo para animales de cautiverio, pero se desconocen casos de invasión o de asociación a ecosistemas locales (^{Hanson, 2016}).

Con el establecimiento de la Ley de Conservación de la Vida Silvestre N° 7317 de 1992, Costa Rica reguló los elementos que involucran a la fauna silvestre, tanto nacional como exótica. Resalta el especial interés en prever y prevenir impactos de cualquier tipo, por parte de fauna exótica sobre los ecosistemas nacionales (^{Hanson, 2016}), por lo que la autorización para importar fauna requiere de seguimiento de los estatutos y consideraciones que establece la Convención sobre el Comercio Internacional de Especies Amenazadas de Fauna y Flora Silvestres (CITES). Existe, por supuesto, un gran interés en el país por la comercialización de fauna, ya sea viva, de partes o derivados, en particular todos aquellos aprovechables en la alimentación (^{Santurino et al., 2016}).

En Costa Rica se ha buscado establecer proyectos de producción masiva de A. domesticus como fuente alternativa en producción de harinas con vías de exportación (^{Pino-Moreno et al., 2014}), recientemente logrando producción y comercialización local (^{Quirós-Blanco et al., 2019}). Sin embargo, la importación de cargamentos de grillos con este fin, de momento no es posible, debido a que de acuerdo al artículo 115 de la Ley de Conservación de la Vida Silvestre los criadores comerciales de artrópodos que deseen importar deben presentar un estudio técnico-científico sobre el potencial invasor de la especie. El reglamento indicó como derrogatoria y transitoria la publicación del protocolo para el estudio técnico-científico, pero a la fecha no ha sido publicado. Este estudio analiza el potencial invasor A. domesticus y propone un protocolo para el requerido estudio técnico-científico, empleando como modelo el grillo costarricense Anurogryllus muticus.

MATERIALES Y MÉTODOS

Realizamos una revisión bibliográfica entre agosto y octubre de 2020, empleando las bases de datos JSTOR y Science Direct, con material publicado entre 1982 y hasta 2020. Las palabras claves consideradas fueron ''Cricket”, ''Cicle”, "Development", ''Reproduction''y "Survival" obteniendo información sobre condiciones ambientales requeridas para el desarrollo (ciclo de vida) y sobrevivencia de A. domesticus en condiciones naturales y de laboratorio. Al mismo tiempo se obtuvo la misma información de condiciones naturales para especies nacionales de la familia Gryllidae, con la finalidad de comparar las condiciones y determinar grados de similitud.

Para proponer el modelo de estudio revisamos el atlas climatológico del Instituto Meteorológico Nacional (2019) y establecimos condiciones de simulación por zonas de vida sensu Holdridge (^{Sasa et al., 2010}) viables o potenciales para el desarrollo de A. domesticus.

RESULTADOS

Condiciones ambientales: En el país la subfamilia Gryllinae es representativa, en términos de diversidad, particularmente su abundancia (^{Lee & Loher, 1995}; ^{Otte, 2006}). De las especies consideradas dentro de la subfamilia, es notorio que para la Estación Biologica La Selva (Sarapiquí, Costa Rica) Otte (2006) describió seis especies con características similares a A. domesticus. El grillo de cola corta Anurogryllus muticus, resulta la especie de mayor abundancia y con mayor probabilidad de poder ser colectada para estudios de laboratorio, por lo que fue seleccionada para proponerse como modelo de estudio.

El grillo de cola corta A. muticus se encuentra en zonas bajas-medias de altitud (Apéndice digital Tabla 1) en bosques húmedos bajos y bosques húmedos premontanos (^{Otte, 2006}). Para su reproducción las hembras pueden poner de 100 a 120 huevos en el fondo de una galería a una profundidad de 20 a 25 cm. En un periodo de hasta 20 días nacen las ninfas y la maduración es de varias semanas (^{Lee & Loher, 1995}).

Como contraste en las técnicas reproductivas de estas dos especies de la subfamilia Gryllinae, la oviposición de A. domesticus se da sobre el sustrato en sitios semihúmedos, mientras que en A. muticus se da en madrigueras u orificios de 20cm de profundidad, aumentando la sensación de humedad hasta en un 5%.

Modelo de estudio técnico-científico: De acuerdo a ^{Sasa et al. (2010}) en Costa Rica se encuentran 12 zonas de vida sensu Holdridge (Apéndice digital Tabla 2), sin embargo, únicamente seis cuentan con condiciones viables para A. muticus y potenciales para A. domesticus solo tres. Estas son el Bosque Seco Bajo, Bosque Semihúmedo Bajo y Bosque Semihúmedo Premontano, por ende, estas zonas de vida serán utilizadas para la simulación del estudio.

Comprender la importancia de estas zonas de vida es crítico antes de establecer el modelo de estudio del potencial de invasión, principalmente al estar en consideración la zona de vida más extensa del país, el Bosque semi húmedo bajo. El modelo de estudio se basa en un experimento de laboratorio (^{Haldar et al., 1999}) donde se simulan las condiciones de temperatura media, humedad media, sustrato y vegetación principal de cada zona de vida, siendo tres tratamientos experimentales y un grupo control con los parámetros establecidos por ^{Lee y Loher (1995}) para estudios de A. muticus.

Se deben recolectar a lo largo del país en zonas de altitud baja media (0 a 1,200 msnm) grupos de A. muticus, hasta alcanzar por lo menos 200 ejemplares (^{Otte, 2006}), con proporción sexual cerca de 1:3 macho:hembra. Los ejemplares deben ser llevados a laboratorio, donde se almacenan en grupos de 50 individuos (35 hembras y 15 machos) en cajas plásticas de capacidad mínima de 65L, las tapas deben ser adaptadas con malla para facilitar la ventilación. Para evitar escape de ejemplares, se emplea vaselina clara, la cual se unta a los costados superiores de la caja. El sustrato debe cubrir el 40% del contenedor, para permitir a las hembras realizar sus galerías de oviposición.

El grupo control será marcado con plumón permanente en la esquina superior derecha como C1 emplea como sustrato tierra húmeda y debe combinarse con 15 a 20% de arena clara, lo que mantiene la humedad, pero evita se concentre en el fondo. Al ser control, no se usa vegetación nativa, sino que se emplean cartones de huevo como refugio, que se colocan en un costado de la caja, llegando a una altura máxima de un tercio de la caja. Se les alimenta ad libitum mediante lechuga o repollo. La temperatura debe ser de 26-27°c con una humedad de 60 a 70%.

El primer tratamiento se marca como T1 y consiste en simular el bosque seco bajo, por lo que de sustrato se emplea tierra (35%) con arena (35%) y hojarasca (30%). La temperatura es regulada mediante calentadores eléctricos para mantenerse entre 24-25°C y la humedad se regula por aspersión manteniendo de 35-45%. La vegetación a emplear puede ser hojas de Anacardium excelsum (espavel) y/o Enterelobium cyclocarpum (guanacaste), se puede emplear plántulas o brotes de Byrsonima crassifolia (nanche) (^{Janzen & Chavarría, 1991}).

El segundo tratamiento se marca como T2 y consiste en simular bosque semihúmedo bajo, aquí el sustrato corresponde a tierra (50%), arena (20%) y hojarasca (30%). La temperatura debe permanecer entre 24-25°C, pero con una humedad de 50-60%, la cual puede regularse por aspersión interna y externa. La vegetación a emplear puede ser Cordia alliodora (laurel), Carapa guianensis (caobilla) o Vochysia ferruginea (botarrama) (^{Janzen & Chavarría, 1991}).

El tercer tratamiento se marca como T3 y simula bosque semihúmedo premontano, el cual requiere sustrato de tierra (60%) y hojarasca (40%). La temperatura se mantiene entre 19-22°C y la humedad es más alta con 60-70%, el mantener esta humedad puede requerir una máquina de neblina, o en su defecto un monitoreo constante de aspersión. La vegetación a emplear puede ser de los géneros Nectandra, Persea, Cinnamomum de la familia Lauraceae, o Cupania de la familia Sapindaceae (^{Janzen & Chavarría, 1991}).

Debe contarse con cajas de almacenamiento extras, debido a que se debe evitar el sesgo de mortalidad por canibalismo de ninfas, de modo que los grillos eclosionados deben trasladarse a otra caja con las mismas condiciones del tratamiento y marcarse según corresponda (C1.a, T1.a, T2.a o T3.a) ahí se les permite crecer sin ser devorados y una vez alcanzada la madurez se trasladan con el resto de adultos. Diariamente deben revisarse los contenedores para eliminar a los individuos muertos y eliminar apariciones de micelios de hongos.

Una vez iniciados los tratamientos, se lleva un control de mortalidad y natalidad de los grillos de cada tratamiento, se mide la cantidad de grillos que eclosionan (nacen) y la cantidad que llegan de ninfa a adulto, junto con el tiempo en días que tardaron en desarrollarse (Apéndice Digital Tabla 3). El estudio debe cubrir un periodo de seis meses a un año para contar con varias generaciones. En caso de muerte prematura de todos los individuos antes de una primera oviposición, debe repetirse el tratamiento para identificar si son las condiciones simuladas las que ocasionaron el fallecimiento. Este control podrá dar pauta de la capacidad que tendría A. domesticus de sobrevivir en los entornos del país con esas condiciones ambientales, en base al desempeño de A. muticus.

DISCUSIÓN

La importación de insectos vivos para Costa Rica con fines de producción masiva sin duda es una alternativa a considerar y, de acuerdo a literatura, es viable en términos de inversión, producción y valor nutricional, aunque si resalta la importancia de un control adecuado de esa producción para evitar desequilibrios ecológicos que han ocurrido en otros casos con insectos (^{Fiaboe et al., 2012}; ^{Bowles, 2018}). Por esto, un protocolo de estudio técnico-científico del potencial invasor de una especie de interés como A. domesticus, resulta fundamental.

Los resultados sugieren que la temperatura, la humedad y el sustrato son los elementos ambientales más importantes en el ciclo de vida de ambas especies de grillos de la subfamilia Gryllinae, lo que concuerda con los estudios de ^{Roe et al. (1985}), ^{Parajulee et al. (1993}) y ^{Apolo-Arévalo y Lannacone (2015}). Es novedoso, mediante esta propuesta, analizar las condiciones climáticas de las zonas de vida del país sensu Holdridge y como pueden afectar el ciclo de vida y sobrevivencia de A. muticus. Esto da pauta de cómo podría desempeñarse la especie de interés comercial A. domesticus en dichas zonas de vida. Una de las diferencias más importantes en el ciclo de vida de estas especies es la oviposición, pues en el caso de A. muticus que coloca los huevos en galerías de 20cm de profundidad, estarían expuestos a una sensación humídica mayor; lo que sugiera que la especie nacional tendría una mayor capacidad adaptativa a incrementos de humedad.

Precisamente, la mayor humedad por los niveles de precipitación que hay en el país, podría hacer más complicado la sobrevivencia y prevalencia de A. domesticus, en caso de un escape tras la importación, debido a que toleran un rango inferior al 60% y de acuerdo a ^{Apolo-Arévalo y Lannacone (2015}) un alto porcentaje de humedad, así como temperaturas menores a 24°C (características ambientales de una gran parte del país) producen ineficiencia en su desarrollo. Esto podría explicar por qué ^{Hanson (2016}) en su estudio de especies de insectos introducidas a Costa Rica, incluye a A. domesticus, pero remarca que se desconoce de casos de invasión, impacto o asociación a los ecosistemas locales.

Finalmente, la inclusión de esta propuesta de protocolo de estudio técnico-científico podría aplicarse directamente con la especie de interés A. domesticus, que de acuerdo a ^{Pino-Moreno et al. (2014}) se encuentra en cultivo en el Museo de Insectos de la Universidad de Costa Rica, además que ya se establecieron proyectos de comercialización local (^{Quirós-Blanco et al., 2019}). Un cultivo con cantidades similares a las establecidas en esta propuesta podría adquirirse y aplicarse con este diseño experimental, corroborando el nivel del potencial invasivo de la especie para las zonas de vida del país.