Resumen ]]>
Se realizó la prueba de disolución “in vitro” de medicamentos a tabletas de acetaminofén de 500 mg, aplicando los parámetros de disolución del método oficial especificado en la USP 26 (2003), con la variante de que la cuantificación se realizó en un cromatógrafo de líquidos de alta resolución acoplado a un detector electroquímico amperométrico. El objetivo fue determinar la cantidad de ]]>
Were tested for dissolution "in vitro" drug into tablets of 500 mg acetaminophen, applying the parameters of dissolution official method specified in the USP 26, with the variant that quantification was performed on a high performance liquid chromatograph resolution coupled to an amperometric electrochemical detector. The objective was to determine the amount of active ingredient is dissolved in applying the method of dissolution ]]>
Keywords: Dissolution test, HPLC, ]]>
Introducción
La prueba de disolución “in vitro” de medicamentos, es la prueba que se realiza a los medicamentos ]]>
“La ]]>
La prueba, generalmente requiere de ]]>
En este caso de estudio del fármaco acetaminofén, empleamos la cuantificación en cromatografía de líquidos de alta resolución (HPLC), acoplado a un detector electroquímico.
El acetaminofén (Paracetamol, N-acetil-p-aminofenol), metabolito activo de la fenacetina es un analgésico derivado de la anilina (alquitrán de hulla) considerado como un fármaco eficaz utilizado como analgésico- antipirético con poca actividad antiinflamatoria, es bien tolerado sin generar los efectos colaterales de la aspirina. (Santaella y Rodríguez, 2006).
Según mencionan Santaella y Rodríguez (2006), el acetaminofén posee acción analgésica y antipirética, con acción antinflamatoria débil, las dosis terapéuticas o repetidas no tienen efecto sobre los aparatos cardiovascular y respiratorio, no irrita el estómago, no causa erosión ni hemorragia, que a veces se observa después de la administración de ]]>
Fundamento
El fenómeno de la ]]>
La prueba de disolución de medicamentos se realiza bajo condiciones controladas y medidas de temperatura, velocidad de agitación, método de agitación, tiempo de disolución, volumen y tipo de medio ]]>
“Un aumento en la temperatura favorece la solubilidad y la velocidad de disolución” (Cárcamo, 1981:83). La temperatura va a ser de 37 °C para todos los métodos de disolución sea cual sea la droga q ue contenga la forma farmacéutica, esto debido a la temperatura corporal ya que en la disolución in vitro se trata hasta donde sea posible de dar condiciones similares a las ]]>
“La velocidad de agitación y el modo de agitar varían la disolución” (Shargel y Andrew, 1993:625). La velocidad de agitación puede variar entre uno y otro medicamento, siendo las más comunes 50, 75 y 100 revoluciones por minuto (rpm), la cual es proporcionada y controlada ]]>
La naturaleza del medio de disolución debe ser considerado de manera que este disuelva bien la droga (Shargel y Andrew, 1993). El tipo de medio de disolución ya ha sido establecido para cada forma farmacéutica (tabletas o cápsulas) que haya sido incluida dentro de la farmacopea oficial, pero es bueno mencionar que ]]>
La solubilidad es la propiedad ]]>
Prueba de disolución “in vitro” de medicamentos
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La prueba de disolución se aplica a tabletas y cápsulas con cualquier potencia, y se realiza en un equipo de disolución especial, diseñado exclusivamente para disolución de medicamentos; además, los métodos para llevar a cabo la prueba son establecidos por la USP u otra farmacopea en el caso de los productos oficiales y por las propias casas fabricantes, en el caso de productos no oficiales.
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La prueba consiste en determinar la cantidad de principio activo que se disuelve, luego de someter 6 dosis a disolución con el respectivo método, el cual establece: medio de disolución, tipo de medio de disolución a 37°C, aparato 1 o 2 (canastas o paletas), velocidad de agitación (de las paletas o canastas en revoluciones por minuto) y el tiempo de disolución.Al finalizar el tiempo de prueba, se toma determinado volumen de muestra de cada uno de los vasos de disolución, se filtra, se ajusta la concentración a la ]]>
Especificaciones para la prueba:
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Según USP 26 (2003) y como se muestra en el cuadro 1, la farmacopea establece como especificaciones que el porcentaje de principio activo disuelto (Q) en cada dosis ensayada, debe ser mayor o igual a Q + 5%, donde Q es indicado por la farmacopea y puede variar entre un producto y otro (normalmente es 80%). Con sólo que una dosis no cumpla con lo especificado, deberán ensayarse 6 dosis más y de las 12 ensayadas en total, el promedio debe ser mayor o igual a Q y ninguna ]]>
Prueba de disolución de ]]>
La droga en particular en la que centramos el estudio fue en la Acetaminofén y la forma farmacéutica son las tabletas de 500 miligramos.
La ]]>
El método de disolución según la USP 26 (2003) para las tabletas de acetaminofén indica: agitación con el aparato 2 (paletas) ]]>
80% en 30 minutos.
Equipo de disolución ]]>
Para realizar la prueba de disolución “in vitro” de medicamentos se utiliza un equipo que consta de seis u ocho cubetas de 1000 mililitros de capacidad, sumergidas sobre un baño de agua que previamente se calienta a 37 °C, donde se introducen las tabletas (o cápsulas) para su disolución, éste además cuenta con seis (u ocho) canastas y seis (u ocho) paletas (aparatos 1 y 2 según la USP) que se cambian dependiendo el que se deba utilizar para proporcionar la ]]>
El equipo consta de las siguientes partes básicas:
• Calentador y controlador de temperatura: proporciona la temperatura requerida (37 °C) para el baño de agua y la mantiene estable durante la prueba.
• Baño de agua: cumple la función de mantener la temperatura del medio de disolución colocado en los vasos de disolución.
• Vasos de disolución ]]>
• Aparatos 1 (canastas) y 2 (paletas): proporcionan la agitación a la hora de la prueba, se utiliza el indicado en la farmacopea (aparato 1 o 2).
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• Panel de control: se introducen los parámetros requeridos para la prueba, como: velocidad de agitación, tiempo de disolución, temperatura del baño, etc.
Detección con detector electroquímico
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Un detector electroquímico se puede considerar casi como universal, es muy sensible a la concentración porque emplea medidas de corriente. Pueden ser clasificados en tres tipos: detector Amperométrico, detector Conductimétrico, detector Potenciométrico.
Según Barquero (2004:30), ]]>
El equipo utilizado para la cuantificación de las muestras provenientes de la prueba de ]]>
Precauciones con los detectores electroquímicos: se deben tener algunas precauciones para ]]>
Ventajas de un detector electroquímico: alta sensibilidad en ensayos, muy selectivo, amplio rango dinámico lineal, respuesta estable, buena reproducibilidad. Desventajas: requiere cuidados especiales ]]>
Sustancias que se pueden determinar con este detector: las que se oxidan o se reducen. El detector electroquímico es bastante selectivo, porque sólo ciertos ]]>
Pueden detectarse por oxidación: fenoles, aminas aromáticas, peróxidos, mercaptanos. Y por reducción: cetonas, aldehídos, nitrilos. En el caso de la Acetaminofén también conocida como Paracetamol y 4 - acetamidofenol, es un fenol, por lo tanto se puede detectar electroquímicamente por la oxidación del analito.
Principio de operación del detector: El analito es reducido u oxidado, al someterse a una corriente predeterminada (voltaje), ocasionada por la interacción entre dos electrodos (el de trabajo y el de referencia), en donde, al analito sufrir la transformación (oxidación o reducción), se crea una diferencia de potencial (en voltios) proporcional a la concentración de la muestra, el cual es graficado contra el tiempo de retención, en el monitor.
Metodología de análisis
Se aplicó el método de disolución oficial (USP 26), para las tabletas de acetaminofén de 500 miligramos, el cual indica: medio de ]]>
2PO4 0.05 M, pH 5.8, temperatura del medio: 37 °C, volumen de medio: 900 mL, velocidad de agitación: 50 rpm, aparato: 2 (paletas), Tiempo de disolución: 30 minutos.
Se cuantificaron con la ]]>
Se preparó ]]>
Los parámetros del método utilizado para la cuantificación fueron los ]]>
detector electroquímico: 2µA, +0.65 Voltios, columna: C-18 de 100 x 4.6 mm y 5 µm, temperatura (columna): 35 °C, flujo: 1 mL/min, inyección: 50 uL, fase móvil: Buffer NaOAc / MeOH (90:10) v/v. Buffer de acetato de sodio (NaOAc): 2,9 mL ácido acético, más 4,1 g de acetato de sodio, más 0,3725 g de cloruro de potasio, para 1000 mL de agua bidestilada.
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Se realizaron seis inyecciones del patrón de acetaminofén y una de cada muestra; se integró el pico cromatográfico para obtener las áreas correspondientes, para efectuar los cálculos respectivos.
Resultados y discusión
Luego de ensayadas las seis tabletas de acetaminofén, se obtuvieron los resultados descritos en el cuadro 2, en el cual observamos que los miligramos de acetaminofén disueltos por tableta oscilaron entre 472,3 mg y 498,6 mg lo que corresponde respectivamente a un rango entre 94,5 y ]]>
Analizando la cantidad de principio activo sólido disuelto, luego de realizada la prueba de disolución a las seis unidosis ensayadas, obtenemos el comportamiento reflejado en el siguiente gráfico. (Figura 1).
Se logra observar en la figura 1, que de los 500 mg/tableta teóricos etiquetados por el producto en estudio, se lograron disolver luego de los treinta minutos de la prueba, entre 472,3 y 498,6 mg de acetaminofén para cada una de las tabletas analizadas. Lo cual representa una variabilidad muy baja de tan solo 1,7% de desvío relativo.
En el cuadro 2, se muestra que en promedio el 97,1 % fue disuelto en 30 minutos, correspondiente a 485,7 miligramos disueltos de acetaminofén (promediado de las seis tabletas ensayadas), además, cada tableta fue superior a Q + 5%, lo cual indica que la prueba de disolución del producto en estudio cumple con la especificación ya que según la farmacopea oficial de los Estados Unidos (USP 26, 2003), para las tabletas de acetaminofén, se debe disolver no menos de Q + 5% y Q es 80 % en 30 minutos, bajo las condiciones establecidas en el método de disolución.
Los resultados obtenidos son satisfactorios, ya que cumplen con los criterios de aceptación expuestos en las farmacopeas oficiales; y es importante destacar que estos estudios de control de calidad deben permitir obtener información del comportamiento de la absorción de un fármaco desde una forma de dosificación sólida tras la administración oral, el cual depende de la liberación de la sustancia medicamentosa del producto medicinal, la disolución o solubilización del fármaco bajo condiciones fisiológicas y la permeabilidad por el sistema gastrointestinal. Debido a la naturaleza crítica de estos primeros dos pasos, la disolución in vitro puede ser relevante a la predicción del rendimiento in vivo. Con base a esta consideración general, se utilizan las pruebas de disolución in vitro para las formas de dosificación oral sólidas, como comprimidos y cápsulas, para evaluar la calidad de un producto medicinal lote a lote; guiar el desarrollo de nuevas formulaciones; y asegurar la calidad y el rendimiento continuados del producto después de ciertos cambios, tales como cambios en la formulación, el proceso de fabricación, el sitio de fabricación y el aumento en escala del proceso de fabricación (FDA, 1997).
Algunas veces no se disuelve el total de la droga que debería de disolverse, debido a que, el tamaño y forma de los vasos de disolución pueden afectar la cantidad de droga disuelta (Shargel y Andrew, 1993). En este estudio logramos disolver el 97% bajo las condiciones establecidas para la prueba, lo cual es muy bueno porque se logra casi el total disolución del fármaco.
El medio de disolución tiene una influencia determinante, ya que efectos como pH, presencia de viscosantes, adsorbentes, tensioactivos, sales, etc, ejercen una influencia decisiva en los procesos de disolución (Cárcamo, 1981). En este caso el medio de disolución empleado (KH2PO4 0.05 M, pH 5.8) muestra un comportamiento idóneo para el caso específico de la acetaminofén.
Es bueno resaltar, que es común obtener resultados favorables cuando de medicamentos se trata, ya que los mismos deben ser manufacturados y probados bajo las más estrictas normas de control de calidad, debido a su uso tan delicado por el ser humano. A pesar de esto siempre hay excepciones y algunas veces se deben rechazar y reprocesar o descartar los productos debido a que no pasan alguna, algunas o ninguna prueba de control de calidad.
Consideraciones finales
• La prueba de disolución “in vitro” se utiliza para evaluar la cantidad de principio activo que se disuelve en las formas farmacéuticas sólidas orales, con el fin de determinar si el producto es o no, apto para el consumo humano.
• Parámetros como el pH del medio, la presencia o no de otras sustancias en el solvente, etc., pueden, también, influir en la solubilidad de los productos”. (Aiache et al, 1996:124).
• Las tabletas de acetaminofén sometidas a prueba, correspondientes a un lote específico, cumplen con las especificaciones para la prueba de disolución, según la monografía individ ual del medicamento descrita en la Farmacopea oficial de los Estados Unidos, USP 26.
• Las pruebas de disolución se deben realizar bajo condiciones fisiológicas, con el fin de permitir la interpretación y correlación de los datos de disolución “in vitro”, en relación al comportamiento “in vivo” del producto (FDA, 1997).
• La cuantificación con el detector electroquímico no es muy común en nuestro país, pero se ha demostrado que es apropiado y que proporciona excelentes resultados ante analitos que presentan propiedades redox, siempre y cuando se le brinde un buen mantenimiento a los electrodos.
• A pesar de que el método utilizado para la cuantificación no es el oficial según USP 26, este es 100% confiable, ya que es un método normalizado para la cuantificación de acetaminofén, e inclusive es un método de verificación para el funcionamiento de detectores electroquímicos.
Referencias
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Barquero, M. (2004). Mecanismos y aplicaciones de la cromatografía de líquidos de alto desempeño. (1era ed.). San José, Costa Rica.. Editorial de la Universidad de Costa Rica. 30 p. [ Links ]
Cárcamo, E. (1981). Cinética de disolución de medicamentos. Secretaría General de la Organización de los Estados Americanos. Estados Unidos. 83 p. [ Links ]
Doménech, J.; Martínez, J.; Plá, J.M. (1998). Biofarmacia y Farmacocinética. (Vol. II.). España. Síntesis S.A. 591 p. [ Links ]
FDA, Guía para la Industria. (1997). Pruebas de disolución de formas de dosificación oral sólidas de liberación inmediata.http://www.fda.gov/Drugs/GuidanceComplianceRegulatoryInformation/Guidances/ucm200707.htm. [ Links ] Little, A.; Swon, J. (1999). Dissolution Discussion Group. (Vol I.). United States. Vankel. 295 p. [ Links ]
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Rosenstein, E. (1993). Diccionario de Especialidades Farmacéuticas. (24a ed.). Colombia: PLM S.A. 1398 p. [ Links ]
Santaella, E.; Rodríguez, R. (2006). Eficacia entre paracetamol e ibuprofeno en el manejo del dolor postoperatorio, en niños programados para cirugía abdominal del hr.“general Ignacio Zaragoza” del I.S.S.S.T.E.. Editorial Red Revista de Especialidades Médico-Quirúrgicas, México. 4 p. Recuperado de http://site.ebrary.com/lib/sibdilibrosp/Doc?id=10125500 & ppg=4. [ Links ] Shargel, L.; Andrew, B.C. Yu. (1993). Applied Biopharmaceutics and Pharmacokinetics. (3rd ed.).United States. Prentice Hall International Editions. 625 p. [ Links ]
USP. (2003). The United States Pharmacopeia 26 and The National Formulary 21. 2921 p. [ Links ]
1. Máster en Sistemas Modernos de Manufactura y Bach. en Laboratorista Químico. Profesor UCR- Recinto Grecia. estebanperezlopez@gmail.com
Recibido 3 de noviembre del 2014 Aprobado 16 de diciembre del 2014
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19962123-12420041301981831998II591FDA^dGuía para la Industria19971999I295Organización Panamericana de la Salud199022019932413982006419933625USP20032921