El fertilizante de origen natural Sulpomag, o sulfato de potasio y magnesio, constituido por K2O 22%, MgO 22%, S 18% y Cl (cloruro) 2,5% y los complejos orgánicos agua de coco 10 y 20% y caseína hidrolizada 250 y 500 mg.l-1, como sustitutos parciales de las sales minerales de Murashige y Skoog (MS), fueron utilizados en la propagación in vitro de banano, Musa sp., cv. Cavendish. El objetivo de esta investigación fue inducir el crecimiento y desarrollo de plantas in vitro en condiciones mínimas de sales minerales inorgánicas, prohibidas en el reglamento técnico para los productos orgánicos. Ápices caulinares, cultivados en medio de cultivo MS, fueron transferidos a 10 formulaciones de multiplicación de brotes suplementadas con KH2PO4 (170 mg.l-1), CaCl2.2H2O (150 mg.l-1), NH4NO3 y KNO3, a 1/5 y 1/10 de la concentración MS, micronutrientes MS y Sulpomag 0,1096 g.l-1, AIA 0,2 mg.l-1 y BAP 5 mg.l-1. El medio de cultivo de enraizamiento fue de igual formulación de sales minerales, con variaciones en los reguladores de crecimiento. Los mejores resultados se obtuvieron con NH4NO3 y KNO3 a 1/5 de la concentración MS, Sulpomag 0,1096 g.l-1 y agua de coco 10 y 20%. Los resultados obtenidos posibilitan la utilización del Sulpomag y el agua de coco como sustitutos parciales de las sales minerales MS en la propagación in vitro de Musa sp., cv. Cavendish en la agricultura orgánica.
Palabras clave: Micropropagación, cultivo in vitro, Musa sp., cv. Cavendish, Sulpomag.
Abstract
The Sulpomag natural fertilizer, or potassium sulfate and magnesium, constituted by K2O 22%, MgO 22%, S 18% and Cl (chloride) 2.5% plus organic complexes of coconut water 10 to 20%, and casein hydrolyzate 250 and 500 mg.l-1, as partial substitutes for mineral salts of Murashige and Skoog (MS), were used in the in vitro propagation of banana, Musa sp., cv. Cavendish. The aim was that the in vitro plants grow and develop in minimum quantities of mineral salts, banned in the technical regulation for organic products. Shoot tips, established in vitro on MS medium, were transferred to 10 treatments for shoot multiplication supplemented with KH2PO4 (170 mg.l-1), CaCl2.2H2O (150 mg.l-1), NH4NO3 and KNO3, at 1/5 and 1/10 of the MS concentration, MS micronutrients and 0.1096 g.l-1 of Sulpomag, IAA (0.2 mg.l-l) and BAP (5 mg.l-1). The rooting medium was the same formulation of mineral salts, only varying on the growth regulators. Best results were obtained in culture media supplemented with NH4NO3 and KNO3 at 1/5 of MS concentration, 0.1096 g.l-1 Sulpomag and coconut water 10 y 20%. The results allow to consider the possibility of using Sulpomag and coconut water, as partial substitutes for MS mineral salts for in vitro propagation of Musa sp., cv. Cavendish for use in organic agriculture.
Keywords: Micropropagation, in vitro culture, Musa sp., cv. Cavendish, Sulpomag
Introducción
El banano y plátano (Musa spp.), pertenecen a la familia Musaceae, una de las mejor caracterizadas entre las monocotiledóneas. Genéticamente, las variedades comerciales se derivaron de las especies silvestres Musa acuminata de genoma AA y M. ]]>
de genoma BB, ambas especies con cromosomas 2n=22. De éstas se reconocieron como hibridaciones naturales a través del tiempo las variedades diploides AB, las triploides AAA, AAB, ABB y las tetraploides AAAA, AAAB, AABB y ABBB (Simmonds y Shepherd 1956), aunque Pillay et ál. (2004) informaron que deben considerarse otros genomas como ‘S’ y ‘T’. Desde el punto de vista comercial, el grupo triploide AAA, constituido por clones estériles y partenocárpicos, es el más importante. Entre éstos destaca el cv. Cavendish, ampliamente cultivado con prácticas orgánicas en el norte del ]]>
Micosphaerella fijiensis), constituyéndose en una alternativa de progreso y bienestar económico para los pequeños y medianos agricultores de la región.
En efecto, la agricultura ]]>
3) y nitrato de amonio (NH4NO3), entre otros. ]]>
Las técnicas del cultivo de tejidos, en especial las relacionadas con el saneamiento de enfermedades sistémicas y la propagación masiva y rápida, se han convertido en herramientas indispensables en el desarrollo de la agricultura. Vasil (2008) considera que este desarrollo se debe en gran medida a la formulación, a partir de la década del 50, de medios de cultivo con altos ]]>
Nicotiana tabacum y suspensiones celulares de Glycine max, respectivamente, se utilizaron en una amplia variedad de especies, incluso muy distantes taxonómicamente. Actualmente el medio de cultivo MS es el ]]>
Por otro lado, la literatura reporta la búsqueda permanente de sustitutos de los componentes del medio de cultivo ]]>
Cattleya sp. ]]>
Arabidopsis thaliana (Pollock y Oppenheimer 1999), los fertilizantes Peters (24-8-16), Floren (10-15-5) y Folifértil (20-30-10) en la micropropagación de Laelia anceps (Romero-Tirado et ál. 2007) y varios abonos foliares comerciales en la micropropagación de nudos de Solanum tuberosum ]]>
Los primeros trabajos sobre micropropagación de banano se realizaron con ápices caulinares (Ma y Shii 1972). Desde entonces numerosas variedades y clones de banano y plátano se propagaron en varias partes del mundo (Krikorian y Croanuer 1984, Sandoval et ál. 1991) hasta alcanzar tasas muy altas de propagación mediante el Sistema de ]]>
Musa sp., cv. Cavendish, en el norte del Perú.
Materiales y Métodos ]]>
Material vegetal
Como material vegetal se utilizaron hijuelos de espada de banano, Musa sp., var. Cavendish, de 20–40 cm de ]]>
Desinfestación y establecimiento del cultivo ]]>
Los hijuelos se lavaron con abundante agua con detergente para eliminar la tierra de cultivo. Luego se deshojaron con un cuchillo de cocina hasta obtener un ápice caulinar de 3 cm de altura. A razón de un explante por frasco se desinfestaron con alcohol etílico 70% durante 1 min e hipoclorito de sodio concentrado (Clorox® 5,25% de cloro activo) con 3 gotas de Tween 20 durante 10 min, enjuagaron con agua destilada esterilizada por 3 veces consecutivas e inocularon en el ]]>
-1 y tiamina.HCl 1 mg.l-1, sacarosa 2%, BAP (benzilaminopurina) 5 mg.l-1 y agar 0,6%. El pH del medio de cultivo se ajustó en 5,8±0,1 con HCl y NaOH 0,1N, antes de dispensarlo en frascos de vidrio de 10x6 cm, y después de sellados, se esterilizaron en 121oC de temperatura y 15 libras/pulgada2 ]]>
-2.s-1 de intensidad lumínica y 16/8 h de fotoperiodo.
En el control de la contaminación bacteriana endógena se utilizó una solución de cloranfenicol y rifampicina, 50 y 30 mg.ml-1, respectivamente, eluídas en agua destilada esterilizada, ]]>
Características e incorporación del Sulpomag
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El Sulpomag o sulfato de potasio y magnesio, es un fertilizante de origen natural con la siguiente composición química: K2O 22%, MgO 22%, S 18% y Cl (cloruro) 2,5% y humedad máxima 0,5%. Sus propiedades físico-químicas se detallan en el Cuadro 1.
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En la incorporación del Sulpomag se adoptó el siguiente criterio y procedimiento: Las sales minerales MS incorporan MgSO4.7H2O 370 mg.l-1 (0,37 g.l-1) y a partir del peso molecular (PM) del compuesto (150 g) y el peso atómico del Mg (24 g), se estableció una relación de 100 g de Sulpomag en 22 g ]]>
4.7H2O 150 g y S 32 g), cuya relación estableció 0,4385 g de Sulpomag y en el caso de la incorporación del potasio (K) se tomó en consideración que en las sales minerales MS éste elemento se incorpora como KNO3 1900 mg.l-1 (1,9 g.l-1) y KH2PO4 170 mg.l-1 (0,17 g.l-1) y con el razonamiento anterior, la sumatoria de la relación estableció 3,5564 g de Sulpomag. En función a estos resultados se consideró la cuarta parte del valor obtenido para el S, es decir, 0,1096 g a incorporar por litro de medio de cultivo, para de esta manera no incurrir en deficiencia de Mg o en exceso de K, que resultaría tóxico. Los valores obtenidos y las relaciones establecidas se detallan en el
Cuadro 2.
Inducción de brotes y enraizamiento de plántulas
Después de 30 ]]>
En la fase de ]]>
mg.l-1 y tiamina.HCl 1 mg.l-1, sacarosa 4%, AIA (ácido indol-3-acético) 0,2
mg.l-1, BAP 5 mg.l-1 y agar 0,6%. Los tratamientos ensayados (T1 – T10) incorporaron KH2PO4 170 mg.l-1 del medio de cultivo MS, CaCl2.2H2O 150
mg.l-1 del medio de cultivo B5 (Gamborg et ál. 1968), los micronutrientes del medio de cultivo MS, Sulpomag 0,1096 g.l-1, sacarosa 4%, AIA 0,2 mg.l-1, BAP 5 mg.l-1 y agar 0,6%; los ]]>
4NO3 y KNO3 (330 y 380 mg.l-1) y T6 –T10 (165 y 190 mg.l-1) que correspondieron a 1/5 y 1/10 del medio de ]]>
mg.l-1 y agua de coco (AC) 10 y 20%, se incorporaron de acuerdo con los tratamientos formulados.
En la fase de enraizamiento los tratamientos tuvieron una formulación similar a lo establecido ]]>
mg.l-1, carbón activado (CA) 0,25% y agar 0,6%. Los tratamientos ensayados (T1–T10) incorporaron todo lo indicado en los tratamientos de medio de cultivo de inducción de brotes con la excepción de que los reguladores de crecimiento AIA y BAP fue- ron sustituidos por AIB 0,2 mg.l-1 y sacarosa 3%, suplementándose, además, CA 0,25%.
En ambos medios de cultivo el pH se ajustó en 5,8±0,1 con HCl y NaOH 0,1N, antes de dispensarlos en frascos de vidrio de 10x6 cm, y después de sellados se esterilizaron en las ]]>
-2.s-1 de intensidad lumínica y 16/8 h de fotoperiodo.
Transferencia a suelo y aclimatación
Plántulas de 3–5 cm de altura fueron sembradas en sustrato esterilizado con calor seco, integrado por una mezcla en proporciones iguales de tierra de cultivo, tierra vegetal, compost y limo (1:1:1:1); luego se colocaron en cámara de plástico para proporcionarles un ambiente artificial de alta humedad. Los riegos se ]]>
Variables evaluadas y análisis estadístico
Después de 60 días de cultivo se evaluó el número de brotes formados, altura del brote, tasa de crecimiento, número de raíces por plántula, longitud de raíces, peso seco y número de plántulas normales (plántulas sin síntomas visuales de deficiencia nutricional, clorosis, necrosis apical o albinismo). Cada tratamiento contó con 12 repeticiones y el experimento se repitió 2 veces. En el análisis ]]>
Resultados y Discusión
Establecimiento del cultivo
El mayor problema en el establecimiento del cultivo in vitro de banano fue la ]]>
Bacillus, contaminación de aspecto cremoso y lechoso, ligeramente mucoide, formada alrededor del explante. Carranza et ál. (2006), al estudiar la propagación in vitro de banano del cv. FHIA-18, informan sobre la presencia de B. subtilis, causante de la alta tasa de contaminación observada, en donde la bacteria cubría totalmente la superficie del ]]>
Según el sitio de colecta del material vegetal, la contaminación bacteriana por Bacillus sp., con presencia de endosporas, llegó a 100%, en especial en ]]>
-1, respectivamente, eluídas en agua destilada durante 48 h. Algunos autores consideran que las especies de este género son contaminantes introducidos como resultado de prácticas deficientes de laboratorio (Leifert y Waites 1993, Carranza et ál. 2006); sin embargo, para la mayoría la principal fuente de ]]>
Inducción y elongación de brotes
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En el Cuadro 3 se observó, en la evaluación realizada en 60 días de cultivo, que en el tratamiento T5 se alcanzó el mayor número de brotes formados (5,4), muy similar a lo obtenido en el testigo (To) (5,1), mientras que en el tratamiento T7 se observó el menor número de brotes formados (2,5). En los tratamientos T6 y T7, los escasos brotes formados no fueron considerados en la fase posterior de enraizamiento debido a su precaria condición ]]>
En un estudio realizado con 4 cultivares de banano, al utilizar sales minerales MS suplementadas con BAP 3–5 mg.l-1, después de 45 días de cultivo, en Curraré (AAB), Dominico (AAB), Gran Enano (AAA) Valery (AAA), se formaron 2,0–4,5 brotes.planta-1 (Sandoval et ál. 1991). En el cv. Hartón (AAB) se alcanzó un índice de multiplicación de brotes de 4,3 en medio de cultivo con BAP 5 mg.l-1 (Colmenares y Giménez 2003); sin embargo, en las mismas ]]>
mg.l-1 y AIA 1,2 mg.l-1, en el plátano cv. Maqueño (AAB) se alcanzó 2,5 brotes ]]>
mg.l-1 se obtuvo 2,1 brotes (Alvard et ál. 1993). Si se comparan estos resultados con los obtenidos en la investigación que se presenta, se observa que fueron ligeramente similares, en unos casos, y en otros ampliamente inferiores, puesto que en esta investigación, tanto en el tratamiento T5 como en el testigo (To), se formaron 5,4 y 5,1 brotes, ]]>
NH4NO3 + KNO3). Al respecto, Colmenares y Giménez (2003) observaron que en el cv. Williams (AAA), en medio de cultivo con BA 1,5
mg.l-1 y AC 20%, se formaron 2,4 brotes, muy similar a lo observado en medio de cultivo con BA 2,5 mg.l-1, sin AC, donde se formaron 2,7 brotes.
Como es conocido, el AC es una ]]>
Kalopanax septemlobus (Moon et ]]>
Cedrela odorata (Peña-Ramírez et ál. 2010), entre otras, lo que se atribuye a la presencia de una mezcla compleja de varias citocininas, entre otras sustancias presentes en el AC, que resultaría químicamente irreproducible (Ge et ál. 2005, 2006). En cuanto al efecto de la CH, en el tratamiento T3, que incorporó MS 1/5 (de la concentración total de NH4NO3 + KNO3) y CH 500 mg.l-1 se observó 4,8 brotes formados, un valor estadísticamente igual al obtenido en el tratamiento T5. Una tendencia similar se observó en Musa del grupo AA donde un mayor número de brotes se formaron en medio de cultivo suplementado con CH 100 mg.l-1, respecto al medio de cultivo carente de este complejo orgánico (Strangsam y Kanchanapoom 2007).
En altura de brotes, en el testigo (To) se alcanzó la mayor altura (1,8 cm), ligeramente superior a lo obtenido en los tratamientos T5 y T8 (1,6 y 1,5 cm, respectivamente); en el tratamiento T6 se observó la menor ]]>
NH4NO3 + KNO3) lo que no fue revertido ni por el suplemento del Sulpomag ni por los aditivos orgánicos complejos (AC y CH); este hecho resultó dramático para los tratamientos T6 y T7 donde las plántulas formadas mostraron una precaria condición fisiológica por lo que fueron descartadas en la continuidad de ]]>
Arabidopsis al cultivarlas en medio de cultivo suplementado con el fertilizante comercial 20-10-20, comparado con lo observado en el medio de cultivo MS y un caso similar también fue reportado por Azofeifa et ál. (2008) al utilizar las formulaciones denominadas AMSF y AMSF+Intra, conformadas por combinaciones de sales minerales y fertilizantes comerciales, en la propagación in vitro de plantas de papa cv. Atzimba. ]]>
Aspectos morfológicos y fisiológicos de los brotes
Como se indica en el Cuadro 3, únicamente los brotes que crecieron en los tratamientos ]]>
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De manera general los tratamientos que mostraron menores concentraciones de nutrientes del medio de cultivo MS, también menor número de plantas normales con resultados dramáticos en los tratamientos T6, que no incorporaron AC y CH y T7, pero sí incorporó CH 250 mg.l-1. Una característica frecuente de las plantas anormales es ]]>
Eucalyptus (Gribble et ál. 2002). Por otro lado, los fertilizantes inorgánicos que se adicionan como complementos a las sales minerales MS o a cualquier otra formulación de sales minerales convencionales, siempre incorporan impurezas o trazas de otros elementos, como cloruros y sodio, que no se consideran en los cálculos o que están ]]>
Enraizamiento
En el Cuadro 4 se muestra los resultados obtenidos en el número de raíces formadas, altura de planta, tasa de crecimiento y peso fresco, después de ]]>
-1 (Sandoval et ál. 1991) y en el cv. Gros Michel, con 1–3 raíces.planta-1 (Portero 1991); sin embargo, resultaron más cercanos con lo informado por Gübbük y Pekmezci (2004) con 10–12 raíces.planta-1.
]]>
La longitud de raíces (datos no mostra- dos en tabla), en los tratamientos T1, T3 y T5, fue superior a 5,0 cm, mientras que en el resto de tratamientos ensayados varió entre 3,5 a 5,0 cm. En los cultivares Curraré, Dominico, Gran Enano y Valery, en 45 días de cultivo, la longitud promedio de raíces fue 1,1 cm.planta-1 (Sandoval et ál. 1991) lo que se atribuyó a que estos autores no ]]>
Laelia anceps donde la mayor formación y longitud de raíces ocurrió en los complejos fertilizantes Peters 25% (24-8-16) y Floren 25% (10-15-5), utilizados como sustitutos de las sales minerales MS, sin reguladores de crecimiento (Romero-Tirado et ál. 2007).
]]>
Sobre altura de planta, el mayor valor correspondió al testigo (To) (5,3 cm) seguido de los tratamientos T4 y T3 (4,8 y 4,7 cm, respectivamente), en tanto que los menores valores correspondieron a los tratamientos T9 y T10 (3,4 y 3,3 cm, respectivamente). La prueba de significación de Duncan indicó que los tratamientos To, T4 y T3 resultaron estadísticamente iguales. La altura de planta durante el enraizamiento suele ser mayor que la altura de planta alcanzada durante el ]]>
Musa AA de los grupos ‘Kluai Sa’ y ‘Kluai Leb Mue Nang’ obtuvieron brotes de 4–5 cm de altura y por Gübbük y Pekmezci (2004) quienes obtuvieron plantas de banano de 4,4–5,9 cm de altura.
Sobre la tasa de crecimiento, el mayor valor correspondió al tratamiento T5 (3,5 cm) seguido de los tratamientos T1 y T4 (2,8 cm), ]]>
Paphiopedilum exstaminodium y P. caudatum (Rodríguez 2000) y Stanhopea ]]>
(Moreno y Menchaca 2007) las mayores tasas de crecimiento se observaron en los tratamientos suplementados con agua de coco y pulpa de plátano, tan igual a lo observado en esta investigación.
En cuanto al peso fresco, el mayor valor correspondió a los tratamientos testigo (To) y T5 (2,3 g) seguidos de los tratamientos T2 y ]]>
Por otro lado, durante el proceso de enraizamiento de brotes se observó, también, la formación de 2–5 nuevos brotes en los tratamientos T4 y T5 en alrededor del 80% de los explantes, mientras que en los tratamientos To ]]>
Aclimatación ]]>
La tasa de supervivencia, en condiciones de invernadero fue 100%, en las plántulas cre-cidas en todos los tratamientos ensayados; sin embargo, la tasa de supervivencia en campo definitivo fue 95%, cifra muy semejante a lo reportado en trabajos similares, al utilizar incluso otros tipos de componentes como humus de lombriz, entre otros (Sandoval et ál. 1991, Canchignia et ál. 2007). ]]>
Conclusiones
El cultivo orgánico del banano exige que los productores cumplan un estricto reglamento entre cuyas normas se establece la no fertilización con nitrato de amonio (NH4NO3) y nitrato de potasio (KNO3) e incluso en los medios de cultivo utilizados en la micropropagación in vitro. Es por ello que en la producción de plantas in vitro de Musa sp., cv. Cavendish, en las áreas agrícolas de Sullana ]]>
g.l-1, 1/5 de NH4NO3 y KNO3 (330 y 380 mg.l-1, respectivamente) del medio de cultivo MS, los micronutrientes MS y agua de coco 20%, observándose 5,4 brotes/explante con altura de 1,6 cm y 100% de plántulas normales, que superaron al testigo que incorporó las sales minerales MS en su concentración total, mientras que el número de raíces formadas fue de 9,3/explante en el mismo medio de cultivo suplementado con AIB 0,2 mg.l-1 y CA 0,25%, sustituyendo ]]>
Literatura Citada
AGRODATA. 2008. AGRODATA, Orgánicos. Banano orgánico: exitosa experiencia de pequeños productores. Dirección de Agronegocios del Ministerio de Agricultura. La Revista Agraria 9 (98):1-16. [ Links ]
ALVARD D., COTE F., TEISSON C. 1993. Comparison of methods of liquid medium culture for banana micropropagation. Effects of temporary immersion of explants. Plant Cell Tissue and Organ Culture 32:55-60. [ Links ]
AZOFEIFA A., GUEVARA E., JIMÉNEZ V.M. 2008. Uso de abonos foliares comerciales en la elaboración de medios de cultivo in vitro. Agronomía Costarricense 32:149-160. [ Links ]
BANERJEE N., DE LANGHE E. 1985. A tissue culture technique for rapid clonal propagation and storage under minimal growth conditions of Musa (banana and plantain). Plant Cell Reports 4:351-354. [ Links ]
BERG L.A., BUSTAMANTE M. 1974. Heat treatment and meristem culture for the production of virus-free bananas. Phytopathology 64:320-322. [ Links ]
CANCHIGNIA H.F., RAMOS L. 2004. Micropropagacion de plátano variedad Barraganete. Informe Técnico s/n. Unidad de Investigación Científica y Tecnológica. Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador. 6 p. [ Links ]
CANCHIGNIA H.F., SIGCHA L.E., TOAQUIZA J.P., RAMOS L.E., SAUCEDO S.G., CARRANZA M.S., CEVALLOS O.F. 2007. Alternativas para la propagación in vitro de plátano variedad Maqueño (Musabalbisiana AAB). Informe Técnico s/n. Unidad de Investigación Científica y Tecnológica. Universidad Técnica Estatal de Quevedo, Ecuador. 15 p. [ Links ]
CARRANZA D., HERRERA L., FRANCO C.M., GARCÍA M., DELGADO, M.S., RAMOS N. 2006. Bacillussubtilis, contaminante bacteriano en la micropropagación de bananos (cv. FHIA-18, AAAB). Centro Agrícola 33:25-30. [ Links ]
COLMENARES M., GIMÉNEZ C. 2003. Multiplicación in vitro Musa spp., mediante sistema de inmersión temporal. Revista de la Facultad de Agronomía (LUZ) 20:468-477. [ Links ]
DJURDJINA R., SARIĆ M., CEROVIĆ R., ĆULAFIĆ L. 2001. Changes in macroelement content of the media and I sweet cherry Inmil GM9 shoots during in vitro culture. Journal of Horticultural Science and Biotechnology 76:295-299. [ Links ]
GAMBORG O.L., MILLER R.A., OJIMA K. 1968. Nutrient requirements on suspensions cultures of soybean root cells. Experimental Cell Research 50:151-158. [ Links ]
GANAPATHI T.R., MOHAN J.S.S., SUPRASANNA P., BAPAT V.A., RAO P.S. 1995. A low-cost strategy for in vitro propagation of banana. Current Science 68:646-650. [ Links ]
GE L., YONG J.W., GOH N.K., CHIA L.S., TAN S.N., ONG E.S. 2005. Identification of kinetin and kinetin riboside in coconut (Cocos nucifera L.) water using a combined approach of liquid chromatography- tandem mass spectrometry, high performance liquid chromatography and capillary electrophoresis. Journal of Chromatography 829:26-34. [ Links ]
GE L., YONG J.W., TAN S.N., YANG X.H., ONG E.S. 2006. Determination of cytokinins in coconut (Cocos nucifera L.) water using capillary zone electrophoresis-tandem mass spectrometr y. Electrophoresis 27:2171-2181. [ Links ]
GEORGE E.F., DE KLERK G.J. 2008. The components of plant tissue culture media. 1- Macro- and micro- nutrients, pp. 65-113. In: E.F. George, M.A. Hall y G.J de Klerk (eds.). Plant propagation by tissue culture. Vol. 1. The background. 3era edit. Springer, Dordrecht, Holland. [ Links ]
GRIBBLE E.K., CONROY J.P., HOLFORD P., MILHAM P.J. 2002. In vitro uptake of minerals by Gypsophila paniculata and hybrid eucalypts, and relevance to media mineral formulation. Australian Journal of Botany 50:713-723. [ Links ]
GÜBBÜK H., PEKMEZCI M. 2004. In vitro propagation of some new banana types (Musa spp.). Turkish Journal of Agriculture and Forestry 28:355-361. [ Links ]
GUTIÉRREZ C. 1996. Propagación clonal in vitro de Cattleya por medio de meristemas. In: Memoria X Congreso Nacional Agronómico y de Recursos Naturales. Vol. 1. San José, Costa Rica. P. 302. EUNA. [ Links ]
HARDY I., DE GARCÍA E. 1994. Micropropagación de bananos (Musa AAA) del subgrupo Cavendish. Phyton 55:31-41. [ Links ]
IAEA (ORGANISMO INTERNACIONAL DE ENERGÍA ATÓMICA). 2004. Informe Anual 2004. Viena, Austria. 99 p. [ Links ]
IBM Corp. Released 2010. IBM SPSS Statistics for Windows, Version 19.0. Armonk, NY: IBM Corp. [ Links ]
KRIKORIAN A.D. 1991. Propagación clonal in vitro, pp. 95-125. In: W.M. Roca y L.A. Mroginski (eds.). Cultivo de Tejidos en la Agricultura. Fundamentos y Aplicaciones. Centro Internacional de Agricultura Tropical. Cali, Colombia. [ Links ]
KRIKORIAN A.D., CRONAUER S.S. 1984. Banana, pp. 327-348. In: D.A. Evans, W.R. Sharp, P.V. Ammirato y Y. Yamada (eds.). Handbook of Plant Cell Culture. Mac Millan Publishing Co. New York. [ Links ]
LEIFERT C., WAITES W.M. 1993. Dealing with microbial contaminants in plant tissue and cell culture: hazard analysis and critical control points, pp. 278-283. In: Physiology, Growth and Development of Plant in Culture. Kluwer Academic Publisher, Dordrecht. [ Links ]
MA S.S., SHII C.T. 1972. In vitro formation of adventitious buds in banana shoot apex following decapitation. Chung-Kuo Yuan I Hsueh Hui (China Horticulture) 18:135-142. [ Links ]
MOON H.K., PARK S.Y., KIM Y.W., KIM S.H. 2008. Somatic embryogenesis and plantlet production using rejuvenation tissues from serial grafting of a mature Kalopanax septemlobus tree. In Vitro Cellular and Development Biology Plant 44:119-127. [ Links ]
MORENO D., MENCHACA R.A. 2007. Efecto de los compuestos orgánicos en la propagación in vitro de Stanhopea tigrina Bateman (Orchidiaceae). Foresta Veracruzana 9:27-32. [ Links ]
MOUTIA M., DOOKUN A. 1999. Evaluation of surface sterilization and hot water treatment on bacterial contaminants in bud culture of sugar cane. Experimental Agriculture 35:265-274. [ Links ]
MURASHIGE T., SKOOG F. 1962. A revised medium for rapid growth and bioassays with tobacco tissue cultures. Physiologia Plantarum 15:473-497. [ Links ]
NIEDZ R.P., EVENS T.J. 2007. Regulating plant tissue growth by mineral nutrition. In Vitro Cellular and Development Biology – Plant 43:370-381. [ Links ]
PEÑA Y.J., JUÁREZ J., GÓMEZ L., JERÓNIMO J.L., GARCÍA I., GONZÁLEZ J.A., ROBERT M.L. 2010. Multiple adventitious shoot formation in Spanish Red Cedar (Cedrela odorata L.) cultured in vitro using juvenile and mature tissues: an improved micropropagation protocol for a highly valuable tropical tree species. In Vitro Cellular and Development Biology–Plant 46:149-160. [ Links ]
PILLAY M.A., TENKOUANO A., UDE G., ORTIZ R. 2004. Molecular characterization of genomes in Musa and its applications, pp. 271-286. In: S.M. Jain y R. Swennen (eds.). Banana Improvement: Cellular, Molecular Biology and Induced Mutations. Science Publishers Inc. Enfield (NH), USA. [ Links ]
POLLOCK M.A., OPPENHEIMER D.G. 1999. Inexpensive alternative to MS medium for selection of Arabidopsis plants in culture. Bio/Technique 26:254-257. [ Links ]
PORTERO S. 1991. Propagación clonal mediante el cultivo de ápices e inducción de callos en plátano (Musa sp.) in vitro. UNPRG, Lambayeque, Perú. 82 p. [ Links ]
REGLAMENTO TÉCNICO PARA LOS PRODUCTOS ORGÁNICOS. 2006. Ley No 29196, Ley de Promoción de la Producción Orgánica o Ecológica. Ministerio de Agricultura. Lima, Perú 9 p. [ Links ]
RODRÍGUEZ M. 2000. Germinación y desarrollo in vitro de Paphiopedilum extaminodium y P. caudatum (Orchidiaceae), especies en peligro de extinción. Tesis de maestría. Universidad Nacional Autónoma de México, México. 56 p. [ Links ]
ROMERO R., LUNA B., BARBA A. 2007. Uso de complejos comerciales como sustitutos de componentes del medio de cultivo en la propagación in vitro de Laelia anceps. Lankesteriana 7:353-356. [ Links ]
ROUSSOS P.A., GASPARATOS D., TSANTILI E., PONTIKIS C.A. 2007. Mineral nutrition of jojoba explants in vitro under sodium chloride salinity. Scientia Horticulturae 114:59-66. [ Links ]
SANDOVAL J.A., BRENES G., SÁNCHEZ L.P. 1991. Micropropagación de plátano y banano (Musa AAB, AAA) en el CATIE. Serie Técnica. Informe Técnico No 186. Centro Agronómico Tropical de Investigación y Enseñanza. Turrialba, Costa Rica. 24 p. [ Links ]
SIMMONDS N.W., SHEPHERD K. 1956. The taxonomy and origins of cultivated bananas. The Journal of the Linnean Society Botany 55:302-312. [ Links ]
STRANGSAM A., KANCHANAPOOM K. 2007. Establishment of in vitro culture of Musa AA group ‘Kluai Sa’ and Musa AA group ‘Kluai Leb Mue Nang’ and the analysis of ploidy stability. Science Asia 33:437-442. [ Links ]
TAIZ L., ZEIGER E. 2006. Plant Physiology. 4ta. Ed. Sinauer Associate, Sunderland, Mass., EUA. 764 p. [ Links ] ]]>
THOMAS P. 2004. A three-step screening procedure for detection of covert and endophytic bacteria in plant tissue cultures. Current Sciences 87:67-72. [ Links ]
VALERIO R., DE GARCÍA E.C. 2008. Transformación genética de plátano (Musa sp., cv. Hartón) mediante biobalística aplicada a tejidos meristemáticos. Interciencia 33:225-231. [ Links ]
VAN DEN HOUWE I. 1998. Elimination of endophytic bacteria from banana tissue cultures. Annual Report INIBAP. 12 pp. [ Links ]
VASIL I.K. 2008. A history of plant biotechnology: from the Cell Theory of Schleiden and Schwann to biotech crops. Plant Cell Reports 27:1423-1440. [ Links ]
*Correspondencia: Frank E. Montenegro-Juárez: Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo, Ciudad Universitaria, Juan XXIII 391, Lambayeque, Perú. Consuelo Rojas-Idrogo: Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo, Ciudad Universitaria, Juan XXIII 391, Lambayeque, Perú. David Quevedo-Calle: Asociación Chira–Centro de Formación Binacional, Mallares, Sullana, Piura, Perú. Guillermo E. Delgado-Paredes: Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo, Ciudad Universitaria, Juan XXIII 391, Lambayeque, Perú. Autor para correspondencia. Correo electrónico: webmaster@unprg.edu.pe 1. Autor para correspondencia. Correo electrónico: webmaster@unprg.edu.pe * Facultad de Ciencias Biológicas, Universidad Nacional Pedro Ruiz Gallo, Ciudad Universitaria, Juan XXIII 391, Lambayeque, Perú. ** Asociación Chira–Centro de Formación Binacional, Mallares, Sullana, Piura, Perú. ]]>
Recibido: 21/01/13 Aceptado: 02/09/13 ]]>AGRODATA2008998981-1619933255-60200832149-16019854351-354197464320-3222004620071520063325-30200320468-477200176295-299295-299196850151-158199568646-650200582926-342006272171-218120081365-113200250713-723200428355-3611996. 130219945531-41IAEA (ORGANISMO INTERNACIONAL DE ENERGÍA ATÓMICA)200499IBM Corp. Released2010199195-1251984327-3481993278-283197218135-142200844119-1272007927-32199935265-274196215473-497200743370-381201046149-1602004271-286199926254-257199182REGLAMENTO TÉCNICO PARA LOS PRODUCTOS ORGÁNICOS2006920005620077353-356200711459-66199118624195655302-312200733437-4422006476420048767-72200833225-2311998122008271423-1440