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1. Introducción
Los parabenos son ésteres del ácido parahidroxibenzoico (p-HBA). Actualmente estos compuestos son ampliamente utilizados como conservantes en cosméticos, artículos de tocador, productos farmacéuticos y productos alimenticios, donde el metilparabeno (MeP) y propilparabeno son frecuentemente más utilizados (Haman et al., 2015; Romero-Nieto et al., 2019). Aunque los parabenos se consideran, en general, seguros, varios estudios sugirieron que podrían actuar como disruptores endocrinos, al producir actividad estrogénica (Kusk et al., 2011), y podrían ser carcinógenos potenciales (Darbre et al., 2004).
Los parabenos son moderadamente solubles en agua (con un rango de 160 µg/ml para bencilparabeno a 2 500 mg/ml para MeP, a 25 °C), aunque su solubilidad disminuye a medida que aumenta la cadena alquílica del parabeno (Cardenas et al., 2017; Peña et al., 2015; Romero-Nieto et al., 2019). La permeabilidad de los parabenos a través de la piel de los organismos y su asimilación en el tejido depende de la longitud de la cadena y de la formulación del producto, disminuye a medida que aumenta la longitud de la cadena del éster (Cardenas, et al., 2015). Por el contrario, su toxicidad aumenta al aumentar la longitud de la cadena (Arvelo et al., 2016; Haman et al., 2015; Soler, 2016).
Debido a su uso generalizado, la aparición de parabenos en ambientes acuáticos, incluidos los ambientes marinos es frecuente. En el caso de MeP (Figura1), se han encontrado promedios de 8.8 y 26 ng/L (Jonkers et al., 2010), y se han informado concentraciones que oscilan entre 3.02 y 31.7 ng/L en el agua costera de Florida USA. (Xue et al., 2017). Además, MeP es el parabeno principal detectado en organismos acuáticos. Los estudios de peces silvestres en todo el mundo revelan altas concentraciones de parabenos, especialmente MeP (hasta 80 %) en sus tejidos (Ramaswamy et al., 2011), que muestran la presencia ubicua de estos compuestos en el medio ambiente acuático. Además, los niveles detectados son más altos en adultos que en peces jóvenes (más del doble), lo que indica una bioacumulación de estos compuestos. Xue et al. (2015), Xue y Kannan (2016) encontraron grandes acumulaciones de parabenos, incluidos MeP y sus metabolitos en mamíferos marinos, peces y aves; así como el potencial de biomagnificación de MeP en una red alimentaria marina. Además, varios estudios muestran que los parabenos causan toxicidad aguda (Kamaya et al., 2015) y crónica en invertebrados acuáticos, incluidos los crustáceos (Terasaki et al., 2013).
Figura 1 Estructura molecular del metilparabeno (Nombre IUPAC: Metil 4 hidroxibenzoato, formula química: C8H8O3, Número CAS: 99-76-3).
Se agudiza la problemática anteriormente descrita porque los contaminantes emergentes no cuentan con un control legal sobre su vertimiento o el uso moderado de estas mismas, por lo cual se precisa una atención especial por parte de la comunidad científica para conocer sus verdaderos efectos sobre la biota y, así, poner en marcha tratamientos que permitan su adecuada depuración en los ecosistemas (Caviedes et al., 2017). Jiménez (2011) argumenta que los fármacos se diferencian de otras sustancias en el agua, ya que presentan una actividad biológica sobre diferentes organismos, debido a que sus propiedades fisicoquímicas facilitan su persistencia y bioacumulación.
Los fármacos son producidos para causar efectos farmacológicos en los seres vivos, por lo tanto, no es de extrañar que diversas investigaciones estén demostrando su nocividad en la biota y sus consecuencias adversas en los ecosistemas (Barceló et al., 2016; Delgado, 2016; Elorriaga et al., 2012; Muñoz, 2017).
Aunque los parabenos son contaminantes relativamente nuevos, algunas investigaciones ya han demostrado su toxicidad y, por ende, la necesidad de regular sus usos en la industria, puesto que por sus propiedades antibacterianas y anti fungicidas, además de su bajo costo y fácil producción son unos de los fármacos más utilizados como conservantes (Caviedes et al., 2017c). En estudios realizados en Estados Unidos de América (EE. UU.) se pudo constatar que, de un total de 22 228 productos, el metilparabeno estaba presente en 7 866, el etilparabeno en 2 310, el propilparabeno en 6 260 y el butilparabeno en 2 784. (Lundov et al., 2009).
La problemática ambiental de fármacos en los ecosistemas colombianos evidentemente presenta grandes vacíos, tanto en sus potenciales efectos, como en los tratamientos necesarios para su degradación. Al no existir ninguna regulación específica sobre productos farmacéuticos en el ambiente acuático, teniendo en cuenta únicamente la prevención y gestión empresarial o institucional, se resta importancia al control de dichos residuos peligrosos (Caviedes et al., 2017; Caviedes & Delgado, 2015).
Conviene subrayar la necesidad apremiante de propiciar más investigaciones científicas, que den paso a la implementación de métodos eficientes con el entorno para el uso adecuado de las sustancias de origen farmacéutico y su oportuno tratamiento en el recurso hídrico, así mismo, sería oportuno que la comunidad científica proyecte a futuro el dar trascendencia a los resultados obtenidos referente a las técnicas propuestas, entre otras, para la depuración de estos contaminantes en ambientes edáficos en contacto con aguas contaminadas, teniendo en cuenta que el suelo es otro recurso vital para la sostenibilidad de la biota.
Para este estudio fueron evaluadas tres técnicas, radiación UV, ozonización y radiación UV y Ozono, para la degradación del metilparabeno presente en agua destilada, previamente contaminada. Los estudios de degradación iniciaron con ensayos preliminares a partir de cromatografía líquida de alta eficiencia y posteriormente por espectrofotometría UV-vis, a la espera de encontrar cuál de las tres técnicas propuestas presenta mayor efectividad en la degradación del fármaco estudiado.
2. Metodología
2.1 Materiales
Los reactivos utilizados para la preparación de soluciones y evaluación de las técnicas fueron de calidad HPLC: metilparabeno (Sigma-Aldrich), metanol, etanol (Merck), acetonitrilo (Merck). Agua destilada (Laboratorio de Química UCC). Material de laboratorio de vidrio (vasos de precipitado, agitadores, placas de Petri, pipetas, balones aforados).
2.2 Equipos
Los equipos utilizados para los procedimientos analíticos en la evaluación de cada una de las técnicas y sustancias de interés fueron: espectrofotómetro UV-Vis, equipo HPLC cromatógrafo líquido modular Agilent 1200 Series, con automuestrador Agilent 1260 Infinity, desgasificador Agilent 1200 Series, bomba cuaternaria Agilent 1200 Series, Detector UV vis con arreglo de diodos e integrados Agilent 1200 Series, Columna Eclipse XDB-C18 (150 mm x 4.6 mm, 3.5-5 µm). Reactor ozono y UV, baño de recirculación termostático, balanza analítica con precisión (0.1 mg).
2.3 Diseño experimental
El método de análisis de la concentración de cada una de las muestras se realizó mediante espectrofotometría UV, de manera similar a la empleada en múltiples trabajos desarrollados en el grupo de investigación (Ruidiaz et al., 2010).
2.3.1 Preparación de soluciones
Preparación de 500 mL de solución con una concentración de 25 µg/mL de metilparabeno.
Se toma muestra de 0.0125 g del metilparabeno y se afora a 500 mL con agua destilada.
2.3.2 Evaluación de técnicas en la degradación de fármacos
Degradación del fármaco con UV: en un reactor aislado a la luz y termostatizado a 25 ºC fue irradiada la solución del fármaco por una lámpara de mercurio de 120 watts (rango de longitud de onda aproximada 350 nm -750 nm), se irradia luz en el espectro UV durante 90 minutos. Se tomaron muestras cada 5 minutos durante los primeros 30 minutos, luego cada 10 minutos durante los 60 minutos restantes.
Degradación del fármaco con ozono: en un reactor aislado a la luz y termostatizado a 25 ºC, se burbujeó ozono a la solución de estudio (ozono 80 mg/L), tomando las muestras en los mismos tiempos trabajados durante la técnica con UV.
Degradación del fármaco con UV y ozono: se repitió el procedimiento descrito en la técnica de ozono (ozono 80 mg/L), adicionando al reactor la lámpara UV (rango de longitud de onda aproximada 350 nm -750 nm).
2.3.3 Análisis de muestras por cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE)
Con el ánimo de verificar si los productos de degradación absorbían a la longitud de onda de máxima absorbancia del fármaco en estudio, mediante cromatografía líquida de alta eficiencia se determinó, inicialmente, el tiempo de retención y pureza pico de un patrón. Posteriormente se realizaron corridas del fármaco expuesto a radiación ultravioleta y ozono, durante diferentes tiempos para identificar el comportamiento cromatográfico de las muestras.
Condiciones CLAE-DAD (cromatografía líquida de alta eficiencia con dispositivo de arreglo de diodos) (Delgado et al., 2014): se empleó un cromatógrafo líquido modular Agilent 1200 Series, con automuestreador Agilent 1260 Infinity, desgasificador Agilent 1200 Series, bomba cuaternaria Agilent 1200 Series, detector UV/VIS con arreglo de diodos e integrador Agilent 1200 Series, así como una columna eclipse XDB-C18 (150 mm x 4.6 mm, 3.5-5 µm) cuya temperatura de operación fue de 25 °C. El volumen de inyección fue de 10 µl (solución de 25 μg / mL); la fase móvil utilizada fue sistema de gradiente lineal de dos solventes agua/acetonitrilo, ambos con ácido trifluoroacético (TFA) al 0.05 % cuya composición de partida fue 90/10 a cero minutos, luego se cambió a 85/15 a los diez minutos. La velocidad de flujo fue de 2.5 ml/min, y la longitud de onda empleada para la cuantificación fue de 256 nm para el metilparabeno; con un ancho de pico de 0.1 minutos, en un rango de escaneo de 190 a 400 nm y un ancho de banda de 1.0 nm con una apertura (slit) de 2 nm. Una vez realizados los diferentes ensayos experimentales, se concluye que los productos de degradación generados por la exposición del fármaco a radiación ultravioleta y ozono no absorben a la longitud de máxima absorbancia del analito. Conforme a lo anterior, la metodología analítica UV/Vis puede ser empleada para el análisis de gradación de la sustancia en estudio. De otro lado esta metodología tiene ventajas en cuanto a la reducción de residuos contaminantes y tiempo de análisis.
2.3.4 Análisis de muestras por espectrofotometría UV-vis
Para la obtención de los espectros, antes de iniciar con los análisis del fármaco en estudio, se utilizó como blanco agua destilada, posteriormente se analizaron las 12 alícuotas de metilparabeno tomadas durante los 90 minutos de exposición a la técnica de radiación ultravioleta.
Las primeras 6 muestras se tomaron cada 5 minutos durante los primeros 30 minutos, las otras alícuotas cada 10 minutos durante los 60 minutos restantes. Cada una de las muestras fue introducida a la celda de cuarzo de 10 mm y de manera inmediata puesta dentro del espectrofotómetro para su respectivo análisis. Se repitió el procedimiento descrito con cada una de las técnicas evaluadas.
3. Resultados y discusión
3.1 Degradación mediante UV y Ozono
3.1.1 Análisis de productos de degradación por radiación UV y ozono del metilparabeno mediante cromatografía líquida de alta eficiencia (CLAE)
En relación con la cromatografía líquida de alta eficiencia se llevaron a cabo los análisis de las soluciones sometidas a degradación UV y Ozono, con el ánimo de verificar si los productos de degradación absorbían a la longitud de onda de máxima absorción, se tuvieron presente los espectros del fármaco correspondientes a 256 nm (Figura2). Se realizaron ensayos tomando la sustancia expuesta a la técnica combinada, para generar productos de degradación.
Figura 2 Cromatograma de metilparabeno sometido a degradación combinada UV y ozono a diferentes tiempos (0, 5, 15, 30 y 60 min) a temperatura ambiente con lambda máxima de 256 nm.
Cuadro 1 Áreas, tiempo de retención (TR) y factor de similitud o de pureza de pico del estándar de metilparabeno y de las muestras expuestas a condiciones de estrés (solución 25 μg/mL)
| Fármaco Tiempo de exposición /minutos | Absorbancia/mAU | Tiempo de retención/ minutos | Pureza de pico / % | |
|---|---|---|---|---|
| 0 | 854 | 3.45 | 999.95±0.01 | |
| 5 | 745 | 3.57 | 995.83±0.01 | |
| Metilparabeno 15 | 15 | 523 | 3.42 | 990.42±0.01 |
| 30 | 201 | 3.33 | 984.25±0.01 | |
| 60 | 78 | 3.54 | 975.25±0.01 |
En los cromatogramas correspondientes a una solución de metilparabeno de 25µg/mL, es evidente un solo pico donde los tiempos de retención estuvieron entre 3.33 y 3.57 minutos y la pureza de pico de 999.95 % equivalente a 99.995 % para tiempo cero, disminuye hasta 975.25 % equivalente a 97.525 % (Cuadro1). El único pico de retención está indicando, posiblemente, la presencia de una sola sustancia mientras transcurre el tiempo de exposición del analito al tratamiento de luz UV y ozono, lo que permite interpretar que la lectura (λmax =256 nm) indica que los productos de degradación generados en la aplicación de la técnica no absorben o absorben a longitudes de onda diferentes a la de máxima absorbancia del fármaco. De otro lado, a medida que aumenta el tiempo de exposición del fármaco a la radiación ultravioleta y el ozono, la concentración de la sustancia se reduce. Esto se refleja en la disminución de la altura del pico o el área de este. Se observa, además, que, el metilparabeno presenta una degradación aproximada del 91 % durante los 60 minutos de exposición al tratamiento, calculados según la Ecuación 1:
Cálculo del porcentaje de degradación
Donde:
Af: medida de la absorbancia de la muestra expuesta al tratamiento combinado de radiación UV y ozono a un tiempo t diferentes de cero.
Ai: medida de absorbancia de la muestra en el tiempo cero, es decir, a la muestra no expuesta al tratamiento, la cual para el presente caso corresponde a una muestra de concentración de 25 µg/mL.
3.1.2 Análisis de la degradación por radiación UV del metilparabeno, mediante espectrofotometría UV
En la Figura3, se presenta los espectros UV del proceso de degradación del metilparabeno expuesto a radiación ultravioleta.
Figura 3 Espectros UV de metilparabeno sometido a degradación UV a diferentes tiempos (0, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 80 y 100 min) a temperatura ambiente.
Se observa que la absorbancia a la longitud de onda máxima (λmax =256 nm) disminuye respecto al tiempo de exposición, confirmándose así una degradación en esta sustancia. Los porcentajes de degradación fueron calculados (Ecuación 1) encontrándose un porcentaje del 47.31 % para el fármaco estudiado, al minuto 90 de exposición a la técnica UV.
3.1.3 Análisis de la degradación por ozonización del metilparabeno mediante espectrofotometría UV
La Figura4 representa los espectros ultravioletas del proceso de degradación del metilparabeno expuesto a ozonización.
Figura 4 Espectros Uv de metilparabeno sometido a degradación ozono a diferentes tiempos (5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80 y 90 min) a temperatura ambiente.
Se puede observar que, la diferencia respecto a la absorbancia de la banda principal (λmax=256 nm) con el espectro final es poco representativa. Esta información puede corroborarse teniendo en cuenta los porcentajes de degradación calculados (Ecuación 1), resulta importante resaltar que la técnica ozono presentó menor degradación, en comparación con la técnica UV. Por consiguiente, el porcentaje de degradación obtenido al minuto 90 de exposición al tratamiento con ozono fue de 28.12 %.
3.1.4 Análisis de degradación por técnica combinada de radiación UV y ozonización, del metilparabeno mediante espectrofotometría UV
Se presentan los espectros ultravioleta del proceso de degradación del metilparabeno, expuesto a la técnica combinada (Figura5).
Figura 5 Espectros Uv de metilparabeno sometido a degradación mixta UV y ozono a diferentes tiempos (0, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 70, 80 y 90 min) a temperatura ambiente.
Logra observarse mayor degradación del fármaco en comparación con las técnicas utilizadas por separado. En efecto, el metilparabeno alcanzó un porcentaje de degradación de 81.07% a los 90 minutos de exposición con el tratamiento mixto. Esta técnica alcanzó a disminuir en grandes proporciones la concentración del fármaco, evidenciándose así, que la absorbancia de la banda principal (λmax = 256 nm) disminuye respecto al tiempo.
3.2 Cinética química
Referente al estudio de la cinética química, fueron evaluadas las técnicas de UV y ozono a diferentes temperaturas de 5 °C, 25 °C y 40 °C, para analizar, en función de esta variable, cuál podría presentar mayor degradación, teniendo en cuenta que la temperatura podría afectar la velocidad de las reacciones al aumentar la energía cinética de las moléculas que interfieren en el proceso de degradación de un fármaco. Conforme con los resultados obtenidos, donde a 25 °C se encontraron los mejores porcentajes de degradación para la sustancia en estudio, respecto a las tres técnicas evaluadas; la técnica combinada se llevó a cabo únicamente a temperatura de 25°C. Para identificar el orden de la cinética de degradación del metilparabeno se utilizó el método gráfico, y se obtuvieron los coeficientes de correlación (Cuadros2,3 y4).
Para la cinética de degradación del fármaco expuesto a la técnica de radiación UV, de acuerdo con el coeficiente de correlación de la ecuación, se presenta una cinética de degradación de segundo orden, lo que indica que la velocidad de reacción depende de la concentración del fármaco y es proporcional al cuadrado de la concentración del reactivo.
Cuadro 2 Coeficientes de las ecuaciones de orden 0, orden 1 y orden 2 para la cinética de degradación del metilparabeno por técnica UV, a 5, 25 y 40 °C (a = intercepto; b = constante; r2 = coeficiente de correlación)
| Orden de reacción | T °C | Coeficientes de la ecuación de la cinética de degradación | ||
|---|---|---|---|---|
| a | b | r2 | ||
| Orden 0 | 5 | 1.7016±0.0457 | -0.0041±0.0004 | 0.8615 |
| 25 | 1.7626±0.0470 | -0.0054±0.0005 | 0.8918 | |
| 40 | 1.7626±0.0470 | -0.0054±0.0005 | 0.8918 | |
| 5 | 0.5411±0.026 | -0.0031±0.0002 | 0.9013 | |
| Orden 1 | 25 | 0.6233±0.0201 | -0.0047±0.0002 | 0.9737 |
| 40 | 0.6233±0.0201 | -0.0047±0.0002 | 0.9737 | |
| 5 | 0.5719±0.0131 | 0.0024±0.0001 | 0.9567 | |
| Orden 2 | 25 | 0.4902±0.0106 | 0.0042±0.0001 | 0.9908 |
| 40 | 0.4902±0.0106 | 0.0042±0.0001 | 0.9908 | |
En cuanto al comportamiento cinético de la degradación por ozono, el metilparabeno presenta un orden definido para la reacción a 25 °C de orden 2; sin embargo, a 5 y 40 °C, se infiere que se presentan seudoórdenes dos y cero respectivamente, lo cual indica que a 40 °C la velocidad de reacción no depende de la concentración. Esto puede deberse a que la solubilidad del ozono, además de depender de la presión, la cual en este caso es contante (presión atmosférica), depende de la temperatura, lo que evidentemente afecta el orden de la reacción.
Cuadro 3 Coeficientes de las ecuaciones de orden 0, orden 1 y orden 2 para la cinética de degradación del metilparabeno por técnica ozono, a 5. 25 y 40°C (a = intercepto; b = constante; r2 = coeficiente de correlación)
| Orden de reacción | T °C | Coeficientes de la ecuación de la cinética de degradación | |||
|---|---|---|---|---|---|
| a | b | r2 | |||
| Orden 0 | 5 | 2.0122±0.0690 | -0.0193±0.0014 | 0.9415 | |
| 25 | 2.2357±0.0078 | -0.0074±0.0001 | 0.9954 | ||
| 40 | 2.2475±0.0154 | -0.0023±0.0003 | 0.8290 | ||
| 5 | 0.7890±0.0044 | -0.0013±0.00009 | 0.9469 | ||
| Orden 1 | 25 | 2.2357±0.0078 | -0.0074±0.0001 | 0.9954 | |
| 40 | 0.8108±0.0074 | -0.0011±0.0001 | 0.8234 | ||
| 5 | 0.4538±0.0020 | 0.0006±0.00004 | 0.9510 | ||
| Orden 2 | 25 | 0.4378±0.0012 | 0.0020±0.00002 | 0.9985 | |
| 40 | 0.4439±0.0035 | 0.0005±0.00007 | 0.8174 | ||
cuanto al tratamiento combinado, la cinética de degradación del metilparabeno sigue un orden uno, por lo que la velocidad de degradación es proporcional a la concentración de fármaco.
Cuadro 4 Coeficientes de las ecuaciones de orden 0, orden 1 y orden 2 para la cinética de degradación del metilparabeno por técnica UV y Ozono, a 5. 25 y 40 °C (a = Intercepto; b = constante; r2 = coeficiente de correlación)
| T °C | Orden de reacción | Coeficientes de la ecuación de la cinética de degradación | |||
|---|---|---|---|---|---|
| 25 | a | b | r2 | ||
| 0 | 2.0122±0.0690 | -0.0193±0.0014 | 0.9416 | ||
| 1 | 0.7963±0.0174 | -0.0175±0.0003 | 0.9952 | ||
| 2 | 0.2993±0.0603 | 0.0184±0.0012 | 0.9504 | ||
3.3 Degradación en función de la técnica
En la degradación del fármaco en estudio en función de la técnica, se realizó una gráfica con el fin de identificar y analizar los porcentajes de degradación calculados (Ecuación 1), respecto al tiempo de exposición del metilparabeno.
En la Cuadro5 y la Figura6, se observan los porcentajes de degradación del metilparabeno en estudio, respecto a las tres técnicas evaluadas a temperatura ambiente.
Cuadro 5 Porcentaje de degradación de metilparabeno en función del tiempo para las técnicas UV y ozono, a temperatura ambiente
| Tiempo (min) | UV | Ozono | UV y ozono |
|---|---|---|---|
| 0 | 0.00 | 0.00 | 0.00 |
| 5 | 0.00 | 1.19 | 19.25 |
| 10 | 2.03 | 3.32 | 25.80 |
| 15 | 3.35 | 5.41 | 30.34 |
| 20 | 7.16 | 7.43 | 34.39 |
| 25 | 10.08 | 9.91 | 39.03 |
| 30 | 12.59 | 12.82 | 42.53 |
| 40 | 17.07 | 16.41 | 55.40 |
| 50 | 22.92 | 19.15 | 60.96 |
| 60 | 29.10 | 22.53 | 66.96 |
| 70 | 33.09 | 25.28 | 72.31 |
| 80 | 40.83 | 28.13 | 77.38 |
| 90 | 47.32 | 35.21 | 81.08 |
Figura 6 Porcentaje de degradación de metilparabeno, a temperatura ambiente (
= técnica UV; 
= técnica ozono; 
= técnica combinada UV y ozono).
Al graficar la degradación en función del tiempo para metilparabeno, de acuerdo con las técnicas empleadas, en la Figura6 se visualiza claramente la eficiencia del tratamiento combinado sobre la técnica de radiación UV y el ozono utilizados por separado. El menor porcentaje de degradación resultó con la técnica ozono alcanzando un 28.13 %, a continuación, la técnica UV 47.32 % y con una gran diferencia el tratamiento combinado, degradó en un 81.08 % el fármaco en estudio, todos los porcentajes fueron tomados del minuto 90 de exposición para cada tratamiento.
Prosiguiendo el análisis de las tres técnicas evaluadas y con el fin de realizar la comprobación estadística de la hipótesis, en la cual se plantea que el tratamiento mixto UV y Ozono presenta mayor efectividad en la degradación del metilparabeno, en comparación con los tratamientos UV y ozonización utilizados por separado; se aplicó, entonces, la prueba Kruskal Wallis. La prueba de Kruskal-Wallis constituye una alternativa no paramétrica al análisis de varianza usual y se considera como una extensión del procedimiento de suma de rangos de Wilcoxon. La hipótesis nula para la prueba de Kruskal-Wallis es que no existe diferencia entre los tratamientos (m1 = m2 = …. = ma), mientras que la hipótesis alternativa es que exista diferencia entre al menos un par de tratamientos (mi ¹ mj). (Miller & Freund, 1989).
Para la selección de la prueba estadística se tuvo en cuenta que se trabajaron datos no paramétricos, se manejaron variables cuantitativas y se compararon más de dos grupos (Wackerly et al., 2002), es decir, los tres tratamientos evaluados para degradar el fármaco. En el estudio estadístico se consideraron las siguientes hipótesis, la hipótesis nula (H0) e hipótesis alterna (H1):
H0: los resultados de las pruebas en las tres técnicas evaluadas son iguales. H1: los resultados de las pruebas en las tres técnicas evaluadas no son iguales.
De acuerdo con la prueba Kruskal Wallis, se observa que existen diferencias estadísticamente significativas para los resultados obtenidos en las tres técnicas evaluadas frente a la degradación del metilparabeno. Dicho lo anterior, se muestra que para metilparabeno p = 0.0001; el valor de p, es decir, la significancia estadística es menor a 0.05 para la sustancia estudiada, por ende, dado este resultado se rechaza la hipótesis nula. En consecuencia, se acepta la hipótesis alterna, así se confirma que los resultados de las pruebas no son iguales, por lo cual sí existe una diferencia estadística significativa entre los tratamientos aplicados. En definitiva, según lo expuesto anteriormente en la degradación en función de las técnicas, confirmando también lo observado en la Figura6; el tratamiento combinado UV y ozono presentó mayor efectividad en la degradación del metilparabeno presente en agua destilada, previamente contaminada.
4. Conclusiones
El tratamiento combinado UV y ozonización obtiene la mejor efectividad en la degradación del metilparabeno comparado con las técnicas UV y ozono aplicadas por separado. De esta manera, la sustancia estudiada presenta un porcentaje de degradación de 81.08 % con la técnica combinada al minuto 90 de exposición al tratamiento. En el caso de la técnica con ozono, esta presenta mínima efectividad en la degradación del metilparabeno en comparación con la técnica de radiación UV, el porcentaje de degradación es 28.13 % durante los 90 minutos de exposición al tratamiento de ozonización y de 47.32 % durante la exposición a radiación UV. Estadísticamente, existen diferencias significativas entre los resultados obtenidos para cada técnica evaluada. Según la prueba aplicada de Kruskal Wallis, los resultados de degradación para los tres tratamientos difieren entre sí, teniendo en cuenta que la significancia estadística fue menor a 0.05. Finalmente, los resultados obtenidos en la presente investigación generan información respecto a una nueva alternativa que permita la degradación de contaminantes farmacéuticos, como el metilparabeno, con el fin de minimizar el impacto ambiental de este tipo de sustancias.
5. Agradecimientos
Los autores expresan su agradecimiento a la Universidad Surcolombiana y la Universidad Cooperativa de Colombia por su gran apoyo en la logística de la presente investigación. Además, a las personas revisoras anónimas de la revista por sus aportes, los cuales enriquecieron el presente documento.
6. Ética y conflicto de intereses
Las personas autoras declaran que han cumplido totalmente con todos los requisitos éticos y legales pertinentes, tanto durante el estudio como en la producción del manuscrito; que no hay conflictos de intereses de ningún tipo; que todas las fuentes financieras se mencionan completa y claramente en la sección de agradecimientos; y que están totalmente de acuerdo con la versión final editada del artículo
