Revista de Biología Tropical

Fifty years of undergraduate scientific field research in the Associated Colleges of the Midwest (ACM) Costa Rica program

Knowledge, perceptions, and practices with respect to the prevention of dengue in a mid-Pacific coastal village of Costa Rica

Dengue fever is the fastest spreading, most prevalent and deadly arthropod-borne viral disease worldwide, present in over 125 countries. In 2013, Costa Rica is experiencing the highest number of Dengue infections since the viruss reintroduction to the country in 1993. This study evaluated the Dengue-related knowledge of 320 community members, and polled opinions on how to better educate and mobilize the community on Dengue prevention in Quebrada Ganado, Costa Rica during March-May, 2013. In addition, property inspections were used to find relationships between knowledge or opinions and presence of Aedes breeding sites. Results showed that while citizens knew the virus is transmitted by mosquitoes that reproduce near water, they lacked knowledge on Aedes habits and confused it with other mosquitoes. Eighty-one percent of respondents assumed some responsibility for dengue prevention. Suggestions for improved education included consistent and continual information on the risks and dangers dengue poses to an individual. Characteristics relating to households with more positive breeding sites were: lower education level, higher prevalence of dengue infections in the household, lesser knowledge of dengue symptoms, a lower rating on the dangers of dengue and a lower rating on the importance of preventative actions. While a range of prevention methods are implemented, active community involvement is highly important for successful Dengue prevention. Continual evaluation is necessary to make more immediate, long-term behavioral societal changes, and to maximize the economic resources spent on Dengue prevention. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 859-867. Epub 2014 September 01.

Entre las enfermedades virales transmitidas por artrópodos, el dengue es la más mortal y de difusión más rápida en el mundo. Es transmitida por los mosquitos Aedes, y está presente en más de 125 países. En 2013, Costa Rica tuvo el mayor porcentaje de casos de dengue desde la reintroducción del virus al país en 1993. Este estudio evaluó el conocimiento de 320 miembros de la comunidad costera de Quebrada Ganado, Costa Rica, quienes dieron sus opiniones acerca de cómo mejorar la educación y movilizar la comunidad en la prevención del dengue durante marzo y abril 2013. Además, mediante inspecciones de propiedades se trató de hallar conexiones entre el conocimiento u opiniones y la presencia de criaderos de Aedes. Aunque los habitantes sabían que el virus es transmitido por los mosquitos que se reproducen cerca del agua, no reconocían los hábitos del mosquito y lo confundían con otros mosquitos. El 81% acepta la responsabilidad por la prevención del dengue. Sugerencias para mejorar la educación incluyeron: información continua y frecuente sobre los riesgos, peligros y daños a la salud. Las características relacionadas con las propiedades que tenían más criaderos fueron: menor nivel de educación, mayor frecuencia de infecciones con dengue, menor entendimiento de los síntomas del dengue, menor calificación dada a los peligros del dengue y menor calificación dada a la importancia de las acciones preventivas. Mientras se pone en práctica una gama amplia de métodos de prevención del dengue, la participación activa de la comunidad es sumamente importante para el éxito de estas actividades. La evaluación continua es necesaria para lograr cambios inmediatos y a largo plazo en el comportamiento social y para aprovechar mejor los recursos económicos invertidos en la prevención del dengue.

Incidence and risk factors for cognitive impairment in rural elderly populations in Costa Rica

Risk factors for the onset of cognitive impairment in Costa Rica are not well understood, despite a substantial elderly population stemming from a higher than average life expectancy for the western hemisphere. To investigate the risk factors that predict the onset of cognitive impairment in the rural elderly of Costa Rica, a modified version of the Mini Mental State Exam-designed for illiterate populations-was administered to 90 elderly inhabitants of San Carlos, Alajuela, Costa Rica between April and May of 2011. Subsequently, each participant took a structured interview assessing viability of risk factors and behaviors potentially contributing to a diagnosis of cognitive impairment. Results showed strong dependencies between age (p=0.0001), education level (p=0.0095), the ability to read (p=0.0001) and write (p=0.0153), frequency of reading (p=0.0011), use of puzzles and mind games (p<0.0001), vocation (p=0.0225), area of residence (p<0.0001), comorbid mental diseases (p=0.0005), history of stroke or brain trauma (p=0.0104), urinary or renal problems (p=0.0443), consistent cooking practices (p=0.0262) and number of living companions (p=0.0299) in susceptibility for developing cognitive impairment. The study concluded that high intellectual use, or lack thereof, during the lifetime of a person was a predictor for cognitive status later in life. In addition, comorbid mental disorders, including neurological trauma due to stroke, impeded normal cognitive function. Future research should examine incidence and risk factors of cognitive impairment in urban, more educated populations. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 869-876. Epub 2014 September 01.

Los factores de riesgo asociados con el inicio de la discapacidad cognitiva en Costa Rica son poco comprendidos, a pesar de la existencia de una considerable población de la tercera edad que ha resultado de una expectativa de vida mayor que el promedio en el hemisferio occidental. Para investigar los factores de riesgo que indican el inicio de la discapacidad cognitiva en adultos mayores de zonas rurales en Costa Rica, se les administró una versión modificada del Mini Examen del Estado Mental diseñado para poblaciones analfabetas a 90 adultos mayores residentes en San Carlos de Alajuela, Costa Rica, entre abril y mayo 2011. Posteriormente cada participante recibió una entrevista estructurada para evaluar la viabilidad de los factores de riesgo y comportamientos que podrían contribuir a un diagnóstico de discapacidad cognitiva. Los resultados mostraron una fuerte relación de dependencia entre la edad (p=0.0001), el nivel educativo (p=0.0095), la capacidad de leer (p=0.0001) y escribir (p=0.0153), la frecuencia de lectura (p=0.0011), la utilización de rompecabezas y juegos de estímulo intelectual (p<0.0001), la vocación (p=0.0225), el lugar de residencia (p<0.0001), las enfermedades mentales comórbidas (p=0.0005), un historial de derrame o de trauma cerebral (p=0.0104), los trastornos urinarios o renales (p=0.0443), la preparación de alimentos en forma consistente (p=0.0262), el número de personas con quienes convive (p=0.0299) y la susceptibilidad de desarrollar la discapacidad cognitiva. El estudio concluyó que un alto nivel de uso del intelecto, o la falta del mismo, durante la vida es un indicador del estatus cognitivo en etapas más avanzadas de la vida. Además, se encontró que las enfermedades mentales comórbidas, como el trauma neurológico provocado por un derrame cerebral, impiden la función cognitiva normal. Se recomienda que futuras investigaciones examinen la incidencia y los factores de riesgo asociados con la discapacidad cognitiva en poblaciones urbanas de mayores niveles educativos.

Conocimiento sobre cáncer de cérvix entre colegiales de San Carlos, Costa Rica

In Costa Rica, cervical cancer is the second most common female cancer, despite accessibility of screening through the universal health care system. There is little understanding of knowledge levels of the adolescent population on cervical cancer, although this population is the most exposed to risk factors. This study sought to learn about male and female adolescent knowledge of preventative methods, infection acquisition, clinical manifestations and medical services. A total of 533 students from grades 7-12 from five public high schools in the rural San Carlos region participated in the study from March through April 2012. Students were found to lack knowledge, as only 30.8% of students stated that they knew what cervical cancer is. Additionally, a connection was lacking between cervical cancer concepts, as for example 75.2% of students had heard of Human Papiloma Virus, but only 33.9% of those students knew that HPV is related to cervical cancer. Age had a positive relationship with knowledge of main concepts (p≤0.001). More women than men had heard of cervical cancer and the Papanicolaou (p=0.025, p≤0.0001), but otherwise no significant difference in mean response between genders was found. Students were found to have a limited awareness of the educational cervical cancer campaign (7.7% of the student population) and the ability to go alone to the doctor to receive medical attention (30.6% of students). Additionally, the public education system does not require cervical cancer to be included in the present curriculum. Hence, as students lack education on prevention and risk factors, the majority of prevention responsibility falls only on the universal health care system to regularly perform Papanicolaou exams to detect pre-cancerous or cancerous changes. The findings indicated the importance of including cervical cancer in the sexual education curriculum of the public education system in Costa Rica to educate the at-risk population of preventative methods, infection development, clinical manifestations and medical services in order to lower the presence of cervical cancer. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 877-886. Epub 2014 September 01.

En Costa Rica, el cáncer de cérvix es el segundo tipo de cáncer femenino más común, a pesar de la accesibilidad del Papanicolaou gracias al sistema de salud universal. No se ha evaluado el nivel de conocimiento de la población adolescente sobre el cáncer de cérvix, aunque este grupo es el más expuesto a los factores de riesgo. Este estudio investigó cuánto sabe el adolescente sobre métodos de prevención, riesgo de infección, manifestaciones clínicas y servicios médicos. En total, 533 estudiantes de séptimo a doceavo año de cinco colegios públicos de la zona rural de San Carlos participaron en esta investigación durante marzo y abril 2012. Se observó que los estudiantes carecen de información, ya que solamente el 30.8% sabían qué es el cáncer de cérvix. Nuestros resultados indican que es importante incluir el cáncer de cérvix en los programas de educación sexual del sistema de educación pública de Costa Rica, para educar a la población en riesgo acerca de los métodos de prevención, desarrollo de la infección y servicios médicos.

Effects of different agricultural systems on soil quality in Northern Limón province, Costa Rica

Conversion of native rainforest ecosystems in Limón Province of Costa Rica to banana and pineapple monoculture has led to reductions in biodiversity and soil quality. Agroforestry management of cacao (Theobroma cacao) is an alternative system that may maintain the agricultural livelihood of the region while more closely mimicking native ecosystems. This study compared physical, biological and chemical soil quality indicators of a cacao plantation under organic agroforestry management with banana, pineapple, and pasture systems; a native forest nearby served as a control. For bulk density and earthworm analysis, 18 samples were collected between March and April 2012 from each ecosystem paired with 18 samples from the cacao. Cacao had a lower bulk density than banana and pineapple monocultures, but greater than the forest (p<0.05). Cacao also hosted a greater number and mass of earthworms than banana and pineapple (p<0.05), but similar to forest and pasture. For soil chemical characteristics, three composite samples were collected in March 2012 from each agroecosystem paired with three samples from the cacao plantation. Forest and pineapple ecosystems had the lowest pH, cation exchange capacity, and exchangeable nutrient cations, while cacao had the greatest (p<0.05). Total nutrient levels of P and N were slightly greater in banana, pineapple and pasture than in cacao; probably related to addition of chemical fertilizer and manure from cattle grazing. Forest and cacao also had greater %C, than other ecosystems, which is directly related to soil organic matter content (p<0.0001). Overall, cacao had more favorable physical, biological and chemical soil characteristics than banana and pineapple monocultures, while trends were less conclusive compared to the pastureland. While organic cacao was inferior to native forest in some soil characteristics such as bulk density and organic carbon, its soil quality did best mimic that of the native forest. This supports the organic cultivation of cacao as a desirable alternative to banana and pineapple monoculture. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 887-897. Epub 2014 September 01.

Muchos de los ecosistemas boscosos naturales de la provincia de Limón, Costa Rica, se han convertido en monocultivos de banano y piña, lo que ha reducido la biodiversidad y la calidad de los suelos. El manejo agroforestal del cacao (Theobroma cacao) es un sistema alternativo, que puede generar ingresos para los agricultores de la región mientras imita mejor los ecosistemas nativos. En esta investigación se compararon los indicadores físicos, biológicos, y químicos de la calidad del suelo en un cacaotal orgánico y agroforestal, una plantación bananera, una piñera, un potrero y un bosque natural. En general, el suelo del cacaotal tuvo características físicas, biológicas y químicas mejores que los monocultivos de banano y piña, mientras las tendencias en comparación con el potrero fueron menos marcadas. Aunque algunas características del suelo en el cacaotal orgánico, como densidad y cantidad de carbono, fueron inferiores al bosque nativo, la calidad del suelo en el cacaotal imitó mejor la del bosque nativo. Los resultados de esta investigación apoyan el cultivo de cacao como una alternativa deseable al monocultivo de banano y piña.

Use of Trichoderma fungi in spray solutions to reduce Moniliophthora roreri infection of Theobroma cacao fruits in Northeastern Costa Rica

Cacao (Theobroma cacao) is an important cash crop in tropical climates such as that of Latin America. Over the past several decades, the infection of cultivated cacao by Moniliophthora roreri, known commonly as monilia, has significantly hindered cacao production in Latin America. Studies have proposed the use of Trichoderma sp. Fungi in biocontrol treatments to prevent and reduce monilia infection, yet tests of Trichoderma-containing spray treatments on cacao agroforests have produced mixed results. Researchers and agricultural workers have suggested that addition of soil, fly ash, or other carbon sources to a Trichoderma spray may improve its efficacy in fighting monilia. To test these suggestions, we designed a series of spray mixtures including Trichoderma cultures, soil, and all necessary controls. We applied the spray mixtures to 80 cacao trees (20 trees for each of four resistant-selected clones to monilia) at the FINMAC organic cacao plantation in Pueblo Nuevo de Guacimo, Limón Province, in northeastern Costa Rica in March-April 2013. Five treatments were applied (control, water, water plus sterilized soil, water plus Trichoderma, and water plus sterilized soil plus Trichoderma). Each treatment was applied to four trees of each clone. We monitored the incidence of moniliainfection under each spray treatment over the course of 35d. We found that spraying entire cacao trees two times with a mixture containing Trichoderma and sterilized soil significantly reduced the incidence of monilia infection by 11% (p<0.05) in only 35d, ascompared to the control. This reduction in loss of cacao pods translates into an increase of plantation mean productivity of 1 500kg dried beans/ha by 198kg/ha up to 1 698kg/ha or by a total increase over the whole 110ha plantation by 21 780kg. We propose that using such an antifungal spray over the whole course of a crop cycle (120 days) would decrease infection incidence even more. Application of this fungal control measure has the potential of revitalizing the production of cacao in the region. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 899-907. Epub 2014 September 01.

El cacao (Theobroma cacao) es un cultivo comercial importante en los climas tropicales como los de América Latina. A lo largo de las últimas décadas la infección de cacao cultivado con Moniliophthora roreri, conocida comúnmente como monilia, ha dificultado la producción del cacao en América Latina de manera significativa. Algunos estudios han propuesto el uso del hongo Trichoderma sp. en tratamientos de control biológico para prevenir y reducir la infección por monilia. No obstante, pruebas realizadas con tratamientos por aspersión que contenían Trichoderma en cultivos de cacao agroforestales produjeron resultados diversos. Investigadores y trabajadores agrícolas han sugerido que la adición de tierra, cenizas volantes u otras fuentes de carbón a la aspersión de Trichoderma podría mejorar su eficacia en la lucha contra la monilia. Para probar la validez de estas sugerencias, diseñamos una serie de mezclas para la aspersión que incluían cultivos de Trichoderma, tierra y todos los testigos necesarios. Aplicamos aspersiones a 80 árboles de cacao (20 árboles para cada uno de cuatro clones seleccionados anteriormente por su resistencia a la monilia) en la finca de cacao orgánico FINMAC en Pueblo Nuevo de Guácimo, provincia de Limón, noreste de Costa Rica durante marzo y abril de 2013. Se aplicaron cinco tratamientos (testigo, agua, agua con tierra esterilizada, agua con Trichoderma, y agua con tierra esterilizada y Trichoderma). Se aplicó cada tratamiento a cuatro árboles de cada clon. Medimos la tasa de incidencia de infección por monilia bajo cada tratamiento por aspersión durante 35d. La aplicación de dos aspersiones a los árboles completos con una mezcla de Trichoderma y tierra esterilizada redujo la tasa de incidencia de infección por monilia en 11% (p<0.05) en solo 35d, en comparación con el tratamiento testigo. Esta reducción en la pérdida de frutos de cacao representa un aumento de 198kg/ha de semillas secas sobre la producción media de 1 500kg/ha, o un aumento total de 21 780kg en toda la plantación de 110ha. Proponemos que el uso de tal aspersión fungicida a lo largo de todo el ciclo de cultivo (120d) produciría una disminución aún mayor de la tasa de incidencia de infección. La aplicación de este método de control fungicida tiene el potencial de revitalizar la producción de cacao en la región.

Ecotourism and primate habituation: Behavioral variation in two groups of white-faced capuchins (Cebus capucinus) from Costa Rica

The increase of ecotourism operations within Costa Rica during the last 20yrs has brought more and more humans into close, direct contact with several wildlife species. One of these species is the white-faced capuchin (Cebus capucinus), highly gregarious, and with exposure over time, willing to come into close vicinity of humans and their developments. Such contact has its advantages and disadvantages for the ecotourism industry. We observed white-faced monkeys in order to assess the impact of human presence and development on monkey behavior, with a focus on aggressive, affiliative, and foraging behaviors in Curú Wildlife Refuge (CWR), located in Puntarenas, Costa Rica, and to ascertain the degree of over-habituation of capuchin populations at CWR. Though there exists no discrete behavioral parameters that measure over-habituation, it can be defined as an extreme state of habituation in which non-human primates not only lose fear of humans, but also actively include humans in social interactions or treat them as a food resource. We used instantaneous focal animal and group scan sampling during 8wks in March and April 2012. Two groups (approximately 20-30 individuals each) of capuchins were observed; the first near the tourist development at the Southwestern area of CWR, representing a habituated population that regularly foraged, rested, and groomed in the presence of humans. The second, was observed in the Northeastern area of CWR, did not visit the center of human activity and exhibited fear of humans. The habituated group exhibited significantly fewer instances of threatened behavior in response to human presence (p<0.0001) than the non-habituated group, and spent significantly more time eating and foraging (p<0.0001). While the habituated monkeys at CWR may not be over-habituated, they could become that way as development, especially ecotourism, increases. Over-habituation is a problem that affects capuchins in certain ecotourism sites in Costa Rica. It is critical that the consequences of habituation be studied more carefully, primarily in areas where ecotourism operations draw visitors to wildlife habitats. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 909-918. Epub 2014 September 01.

El aumento de actividades ecoturísticas en Costa Rica durante los últimos 20 años ha ocasionado que más y más personas entren en contacto directo y cercano con varias especies de vida silvestre. Una de estas especies es el mono carablanca (Cebus capucinus), que es muy gregario y, al pasar el tiempo, tiende a acercarse a los humanos y sus instalaciones. Tal contacto tiene ventajas y desventajas para la industria del ecoturismo. Observamos monos carablanca con el fin de evaluar el impacto de la presencia humana y la infraestructura en el comportamiento de estos animales, enfocando los comportamientos de agresión, acicalamiento y forrajeo para determinar el grado de habituación excesiva de las poblaciones de monos capuchinos en el Refugio de Vida Silvestre Curú, Puntarenas, Costa Rica. Aunque no existen parámetros específicos de comportamiento para medir la habituación excesiva, se puede definir esta condición como un estado en que los primates no humanos no solamente pierdan su temor a los humanos, sino que también incluyen a las personas activamente en sus interacciones sociales o las consideran como una fuente de alimentación. Los monos carablanca fueron observados a través del muestreo instantáneo focal y por escaneo grupal durante ocho semanas de marzo y abril de 2012. Dos grupos (aproximadamente 20-30 individuos cada uno) fueron observados; uno cerca del desarrollo turístico en la parte suroeste del refugio, que representó una población habituada que de manera regular comía, descansaba y se acicalaba en presencia de humanos; el segundo grupo, que se observó en el noreste del refugio, no visitaba el centro de actividad humana y mostraba temor hacia los humanos. El grupo habituado mostró significativamente menos ocasiones de comportamiento amenazante ante la presencia humana (p<0.0001) y empleó más tiempo comiendo y buscando alimento (p<0.0001). Aunque el grupo de habituados en Curú probablemente no tenga habituación excesiva, esta condición podría surgir más adelante, especialmente si aumenta el desarrollo, y en particular el ecoturismo. La habituación excesiva es un problema que afecta a los monos carablanca en ciertos sitios secoturísticos de Costa Rica. Es de suma importancia que las consecuencias de la habituación excesiva se estudien más a fondo, principalmente en las áreas donde las actividades ecoturísticas atraen visitantes a los hábitats de la vida silvestre.

Species richness and relative species abundance of Nymphalidae (Lepidoptera) in three forests with different perturbations in the North-Central Caribbean of Costa Rica

Measurements of species richness and species abundance can have important implications for regulations and conservation. This study investigated species richness and abundance of butterflies in the family Nymphalidae at undisturbed, and disturbed habitats in Tirimbina Biological Reserve and Nogal Private Reserve, Sarapiquí, Costa Rica. Traps baited with rotten banana were placed in the canopy and the understory of three habitats: within mature forest, at a river/forest border, and at a banana plantation/forest border. In total, 71 species and 487 individuals were caught and identified during May and June 2011 and May 2013. Species richness and species abundance were found to increase significantly at perturbed habitats (p<0.0001, p<0.0001, respectively). The edge effect, in which species richness and abundance increase due to greater complementary resources from different habitats, could be one possible explanation for increased species richness and abundance. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 919-928. Epub 2014 September 01.

La medición de la riqueza y abundancia de especies puede indicar la salud de un ecosistema y tener implicaciones importantes para la conservación y su regulación. Este estudio investigó la riqueza y abundancia de mariposas de la familia Nymphalidae en hábitats alterados y no alterados, primordialmente en la Reserva Biológica Tirimbina y en la Reserva Privada Nogal, Sarapiquí, Costa Rica. Se colocaron trampas cebadas con banano podrido en el dosel y sotobosque de tres hábitats: en un bosque primario, en el lindero entre un río y un bosque y en el lindero entre una plantación de bananos y un bosque. Se atrapó e identificó un total de 71 especies y 487 individuos durante mayo y junio 2011 y en mayo 2013. Se encontró que la riqueza y la abundancia de especies aumentaron significativamente en los hábitats de los linderos (p<0.0001, p<0.0001 respectivamente). El efecto de borde, según el cual la riqueza y la abundancia de especies aumentan a causa de la existencia de más recursos complementarios provenientes de dos hábitats distintos, podría ser una posible explicación del aumento en la riqueza y la abundancia de especies en hábitats alterados.

Beach almond (Terminalia catappa, Combretaceae) seed production and predation by scarlet macaws (Ara macao) and variegated squirrels (Sciurus variegatoides)

Knowledge of ecological impacts of exotic beach almond (Terminalia catappa) in the central Pacific of Costa Rica are little known, but studies have found this species to be a potentially important food source for endangered scarlet macaws (Ara macao). In this study, reproductive phenology and seed predation by variegated squirrels (Sciurus variegatoides) and scarlet macaws were measured during March and April 2011 on beaches of central Pacific coastal Costa Rica. Seed productivity and predation levels were quantified on a weekly basis for 111 beach almond trees to assess the importance of beach almond as a food source for scarlet macaws and the extent of resource partitioning between seed predators. Seed production of the trees was great (about 194 272 seeds) and approximately 67% of seeds were predated by seed predators. Macaws consumed an estimated 49% of seeds while squirrels consumed 18%. Additionally, evidence of resource partitioning between squirrels and macaws was found. Scarlet macaws preferred to feed on the northern side and edge of the canopy while squirrels preferred to feed on the southern and inside parts of the canopy. Both species ate most seeds on the ocean side of the tree. Despite the status of this tree as an exotic species, the beach almond appears to be an important resource for scarlet macaw population recovery. The resource produced by this tree should be taken into account as reforestation efforts continue in Costa Rica. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 929-938. Epub 2014 September 01.

El conocimiento de los impactos ecológicos del almendro de playa exótico (Terminalia catappa) en el Pacífico Central de Costa Rica son poco conocidos, pero los estudios han encontrado que esta especie es una fuente de alimento potencialmente importante para la lapa roja (Ara macao), en peligro de extinción. En este estudio, se midieron la fenología reproductiva y la depredación de semillas por las ardillas (Sciurus variegatoides) y lapas rojas durante marzo y abril 2011 en las playas de la costa Pacífica Central de Costa Rica. Los niveles de productividad y depredación de semillas se cuantificaron semanalmente para 111 almendros de playa, para evaluar la importancia del almendro de playa como fuente de alimento para la lapa roja y el grado de repartición de recursos entre los depredadores de semillas. La producción de semillas de los árboles fue alta (cerca de 194 272 semillas) y aproximadamente el 67% de las semillas fueron comidas por los depredadores, las lapas rojas consumen un estimado de 49% de las semillas, mientras que las ardillas consumen el 18%. Adicionalmente, se encontró evidencia de la repartición de recursos entre las ardillas y las lapas. Las lapas rojas prefieren alimentarse en el lado norte y el borde de la copa, mientras que las ardillas prefieren las regiones del sur y el interior de la copa. Ambas especies se comieron la mayoría de las semillas en la parte del árbol con lado al mar. A pesar de la situación de este árbol como una especie exótica, la playa de almendras parece ser un recurso importante para la recuperación de la población de lapas rojas. El recurso que produce este árbol debe tomarse en cuenta para continuar con los esfuerzos de reforestación en Costa Rica.

Species diversity and activity of insectivorous bats in three habitats in La Virgen de Sarapiquí, Costa Rica

Pineapple farms make up 45 000ha of Costa Rican landscape and are the second most exported crop. This is economically beneficial for the Costa Ricans, but greatly affects the natural flora and fauna because it is such a low growing crop. This study examined the differences in insectivorous bat species diversity and activity in the habitat gradient between the forest in Tirimbina Biological Reserve in La Virgen de Sarapiquí, Heredia, Costa Rica and the nearby pineapple farm called Finca Corsicana. Over a four week period in March and April 2013, ultrasonic recorders were placed at different sites to pick up the bats’ calls. Then the recordings were analyzed to identify the species. There were four families present and 19 different species. There was a significant decrease in the number of bat passes (the number of times a bat passes the recorder) in the pineapple farm (x=22.6), in comparison to the border (x=39.9), and the forest (x=44.2) (p=0.0028). Agricultural environ- ments affected and lowered bat presence. Also, a greater mean number of bats recorded between 1900-1930hrs compared to 1730-1800hrs, coincided with the setting of the sun and beginning of bat activity. More research is need throughout the night and the year to establish clearer patterns of bat use and activity in different habitats.

Hay 45 000ha de piñeras en Costa Rica. La piña es la segunda fruta de mayor exportación en el país, por lo cual es muy importante para la economía. Este cultivo beneficia al país en términos económicos; no obstante, tiene efectos negativos en la flora y la fauna de áreas naturales al ser una planta herbácea de baja altura. Esta investigación examinó la diversidad y actividad de los murciélagos insectívoros en el gradiente entre un bosque (Reserva Biológica Tirimbina) y una piñera (Finca Corsi- cana) en la Virgen, Sarapiquí, Costa Rica. Durante cuatro semanas, puse grabadoras en tres sitios (bosque, borde de bosque y piñera) para grabar las llamadas de los murcié- lagos. Después analicé las llamadas para identificar las especies. Encontré cuatro familias y 19 especies. Hubo una reducción en el número de pases de murciélagos (número de veces que un murciélago vuela al lado de la grabadora) en la piñera (x=22.6), en comparación con el borde de bosque (x=39.9) y el bosque (x=44.2) (p=0.0028). El ambiente agrícola afectó y redujo la presencia de murciéla- gos. Familias diferentes parecen estar adaptadas a hábitats diferentes. Finalmente, un mayor número de murciélagos fueron registrados entre las 19:00 y 19:30 hrs, comparados con las 17:30-18:00 hrs, lo cual coincide con el atardecer y el inicio de la actividad nocturna de los murciélagos. Se necesita más investigación, tanto en horas nocturnas, como del resto del año, para entender mejor los patrones de actividad y el uso de diferentes hábitats.

Diversity, abundance and distribution of benthic macrofauna on rocky shores from North Sucre State, Venezuela

The rocky intertidal zone is among the most extreme physical environments on Earth. Organisms living in this area are constantly stricken by physico-chemical and biological factors. Due to the ecological importance of these areas, we studied the diversity, abundance and distribution of the rocky coastline benthic macrofauna, from the North coast of Sucre State, Venezuela. We performed bimonthly samplings from November 2008 to September 2009. The collection of biological material in the littoral zone (supra, mid and infralittoral) was done manually with a grid of 0.25m². Organisms were preserved in 10% formalin for later identification and analysis (ecological parameters and Kruskal-Wallis test to the abundance and diversity). We found a total 19 020 organisms (86spp.), in 8 phyla, 45 families and 47 genera. Mollusks were the most abundant and diverse (58 spp.), followed by arthropods (12spp.), annelids (7spp.), echinoderms (5spp.), and the less represented cnidarians, sipunculids, nemertinids and urochordates (1sp.). The zonation found coincided with the universal scheme of zonation. The towns of Rio Boca and Rio Caribe presented the highest values of ecological parameters, and the lowest were found in Playa Grande. Statistical significant differences were found in the abundance and diversity of macrofauna among the three zones. The little information on the composition and distribution of macrobenthic rocky coastline, prevents a better comparison, however the results contribute to the knowledge of the marine biodiversity in this region.

La zona litoral rocosa esta entre los ambientes físicamente más extremos de la tierra. Los organismos que allí habitan son azotados alternadamente por factores físico-químicos y biológicos. Debido a la gran importan- cia ecológica que poseen estos ambientes, se estudió la diversidad, abundancia y distribución de la macrofauna bentónica del litoral rocoso, en la costa norte del estado Sucre, Venezuela. Se realizaron muestreos bimensuales, durante un año. La recolecta del material biológico se realizó de forma manual, dentro de una cuadrícula de 0.25m², en la zona litoral (supra, medio e infralitoral). Los organismos fueron preservados en formalina al 10% para su posterior identificación y análisis (parámetros ecológi- cos y prueba Kruskal-Wallis a la abundancia y diversidad). Se obtuvieron un total 19 020 organismos (86spp.), en 8 filos, 45 familias y 47 géneros. Los moluscos fueron los más abundantes y diversos (58 spp.), seguido de los artró- podos (12spp.), anélidos (7spp.), equinodermos (5spp.), y cnidarios, sipuncúlidos, nemertínidos y urocordados (1sp.). Los resultados encontrados, coincidieron con el esquema universal de zonación de Stephenson & Stephenson (1949). Las localidades de Río Caribe y Boca de Río presentaron los valores más altos de los parámetros ecológicos y Playa Grande los más bajos. Estadísticamente se observaron diferencias en la abundancia y diversidad de la macrofauna, entre las tres zonas. La poca información de la composición y distribución macrobentónica del litoral rocoso, impide una mejor comparación, no obstante los resultados contri- buyen al conocimiento de la biodiversidad marina en esta región venezolana.

Efficacy of calcein and Coomassie Blue dyeing of shell growing-edges and micro growth-bands: Ageing juvenile of Pinctada mazatlanica (Pterioida: Pteriidae)

Age validation is the first step to determine shellfish species age determination. This information is vital for different inferential models used in marine ecosystem management activities. In spite that various validation techniques are used for marking carbon calcium structures, the calcein marking technique for oysters had never been used for age validation in Pinctada mazatlanica. Thus the objectives of this study included: the evaluation of calcein to mark a shell growing-edge, and the efficacy of Coomassie Blue staining on posterior shell growth, to produce visible micro growth-bands that would enable age validation of juvenile mother-of- pearl oysters. Oysters were collected and cultivated at The Perlas del Cortez S. de R. L. MI. pearl-farming opera tion, in Pichilingue, La Paz Bay, Baja California Sur, Mexico; a total of 36 oysters (shell height 11.5-36.4mm) were injected with calcein (0.125g/L), and another 50 oysters (shell height 14.8-42.7mm) were submersed in calcein (0.4 and 0.7g/L). Shell slices of calcein-marked oysters were posteriourly stained with Coomassie Blue R-25 for micro growth-band recognition. Our results showed that Calcein marking only worked by submersion and produced a concise bright lime-green florescent band along the growing-edge with clear boundaries for both concentrations. However, marks resulted better at the lower calcein concentration (0.4g/L) with more “perfect” and “good” marks on the growing-edge (p=0.0012). Commassie Blue staining technique was successful, and allowed to conclude that one micro growth-band was laid down per day, similar to other oyster species. Mean 15-d increment of shell growth height was slightly greater at the lower calcein concentration ( =0.735mm) than at the higher one ( =0.577mm) (not significant difference, p=0.198). Calcein marking of shell growing- edges and Commassie Blue staining of posterior shell growth, as a method for age validation is recommended for shellfish shell growth-band counts. This will allow back-dating for estimation of very precise colonization dates, both spatially and temporally in future work.

La validación de la edad es el primer paso para determinar las edades de las especies de moluscos, esta información es de vital importancia para los diferentes modelos de inferencia utilizados en actividades de gestión de los ecosistemas marinos. Diversas técnicas de valida- ción se utilizan para marcar estructuras de carbonato de calcio, aunque la técnica de marcado de calceína en ostras nunca se había utilizado para la validación de la edad de P. mazatlanica. Los objetivos de este estudio fueron: evaluar la calceína como marcador interno de la concha y la eficiencia del azul de Coomassie en la tinción de la matriz proteica de la concha, para facilitar la observación y conteo de micro bandas de crecimiento que permiten validar la edad de las ostras juveniles de madre perla. Las ostras fue- ron recolectadas en la costa de la empresa Perlas del Cortez S. de RL MI., en Pichilingue en Bahía de La Paz, Baja California Sur, México. Se inyectaron 36 ostras (altura de concha 11.5-36.4mm) (0.125g/L de calceína) y otras 50 ostras (altura de la concha 14.8-42.7mm) se sumergieron (0.4 y 0.7g/L de calceína). Secciones de la concha marcadas con calceína fueron teñidos con azul de Coomassie R-25 para el reconocimiento de las micro bandas de crecimiento. El marcado con calceína fue exitoso por inmersión y produjo una banda fluorescente de color verde lima brillante con- cisa a lo largo del crecimiento interno de la concha. Sin embargo, las marcas fueron mejores a una concentración de calceína inferior (0.4g/L), con mayor cantidad de marcas “buenas” y “perfectas” (p=0.0012). La técnica de tinción con azul de Commassie también fue exitosa. Se detectó un crecimiento diario por micro banda, similar a lo encontrado en otras especies de ostras. La diferencia del crecimiento medio en relación a la altura de la concha en un lapso de 15 días, fue ligeramente mayor con una concentración de calceína inferior ( =0.735mm) que con la de mayor concentración ( =0.577mm), pero no significativamente (p=0.198). El marcado de conchas con calceína y tinción de matrices proteicas con azul de Coomassie posterior a su crecimiento, es recomendando como un método para la validación de la edad facilitando el conteo de micro bandas de crecimiento internas de la concha. Además, permitirá estimar edades con el fin de predecir fechas de colonización y ubicación de bancos naturales.

Bio-filtration capacity, oxygen consumption and ammonium excretion of Dosinia ponderosa and Chione gnidia (Veneroida: Veneridae) from areas impacted and non-impacted by shrimp aquaculture effluents

Mollusks are some of the most important, abundant and diverse organisms inhabiting not only aquatic ecosystems, but also terrestrial environments. Recently, they have been used for bioremediation of aquaculture effluents; nevertheless, for that purpose it is necessary to analyze the capacity of a particular species. In this context, an experimental investigation was developed to evaluate the performance of two bivalves C. gnidia and D. ponderosa, collected from areas with or without shrimp aquaculture effluents. For this, the filtration capacity (as clearance rate) as well as the oxygen consumption and ammonia excretion rates were measured following standard methods. The clearance rate was significantly higher for D. ponderosa from impacted areas, when com- pared to C. gnidia, from both areas. Contrarily, the oxygen consumption was greater for C. gnidia from impacted areas compared to D. ponderosa from both areas. The same tendency was observed for the ammonia excretion with the highest rates observed for C. gnidia from impacted areas, whereas no differences were observed among D. ponderosa from both areas. The results suggest that both species developed different strategies to thrive and survive under the impacted conditions; D. ponderosa improved its filtration efficiency, while C. gnidia modified its oxygen consumption and ammonia excretion. We concluded that both species, and particularly D. ponderosa, can be used for bioremediation purposes.

Los moluscos son algunos de los organismos más importantes, abundantes y diversos que habitan no solo ecosistemas acuáticos sino también terrestres. Recientemente ellos han sido utilizados para la biorremediación de efluentes acuícolas; para este propósito, es necesario conocer la capacidad de especies particulares que funcionan como biorremediadores. En este contexto, se evaluó la eficiencia de filtración (medida como tasa de clarificación), así como las tasas de consumo de oxígeno y excreción amoniacal en los bivalvos D. pon- derosa y C. gnidia recolectados en áreas impactadas y no impactadas por efluentes de granjas camaroneras. La tasa de clarificación fue mayor para D. ponderosa procedente de áreas impactadas, comparada con la de C. fluctifraga en las dos áreas de recolecta. Contrariamente, la tasa de consumo de oxígeno fue superior en C. gnidia en las áreas impactadas al compararla con organismos de áreas no impactadas y con D. ponderosa de las dos áreas de recolecta. La tasa de excreción amoniacal siguió una tendencia similar con valores más altos para C. gnidia en áreas impactadas, mientras que no se observaron diferencias para D. ponderosa entre las áreas de recolecta. Los resultados sugieren que ambas especies desarrollan diferentes estrategias para adaptarse y sobrevivir bajo condiciones de impacto; D. ponderosa mejora su eficiencia de filtración y C. gnidia modifica su consumo de oxígeno y excreción amoniacal. Se concluye que ambas especies, pero sobre todo D. ponderosa pueden ser utilizadas con propósitos de biorremediación.

Macroperipatus ohausi: redescription and taxonomic notes on its status (Onychophora: Peripatidae)

Onychophora have undergone a new wave of taxonomic revisions in the last three years. After a recent revision, only two species of Macroperipatus are registered from Brazil: Macroperipatus ohausi and Macroperipatus geayi. The former was only the second species of Onychophora to be described from Brazil, and is herein redescribed, illustrated, and its taxonomic status revised. Macroperipatus ohausi had only been collected at the type locality, Petrópolis, state of Rio de Janeiro, but has not been found there since its discovery. In 2009 we collected two specimens of this species in an Atlantic rain forest fragment in Nova Iguaçu in RPPN dos Petroleiros (also state of Rio de Jane iro). The color of the new specimens was interpreted and described based on the NBS/ISCC System of Color Designation, and corresponds only weakly to that described in earlier publications on M. ohausi. The identification of M. ohausi was based solely on its morphology and compared with its original description. In addition, a female syntype of M. ohausi deposited in the Zoologisches Museum (Hamburg) was examined. We reinvestigated its external morphology and concluded that the dorsal papillae have been misinterpreted in M. ohausi in previous studies of its integument. The new specimens examined are conspecific with M. ohausi mainly by having conical primary papillae, different sized accessory papillae, and by the number of legs. Our material resembles the original description of M. ohausi, for example, in spinous pad and nephridial tubercles, even though these features are not represented in the original description and rede- scription of M. ohausi; these features are further detailed here. We concluded that the dorsal papillae morphology of M. ohausi, shares diagnostic characters, for example, with representatives of the genera Peripatus and Epiperipatus. The dorsal papillae are rounded and not square as in the original description and redescription. Another argument that supports our conclusion is that the RPPN dos Petroleiros, the locality where the new samples were collected, belongs to the same mountain chain and Atlantic mosaic as the original material of M. ohausi. Furthermore, a male of M. ohausi is described here for the first time. Based on our morphological data, we transfered this species to the genus Epiperipatus, proposing a new combination, E. ohausi.

Onychophora experimentó una nueva serie de revisiones taxonómicas en los últimos tres años. Después de una reciente revisión, sólo dos especies de Macroperipatus fueron registradas para Brasil: Macroperipatus ohausi y Macroperipatus geayi. La primera fue solo la segunda especie de Onychophora en ser descrita en Brasil y aquí es redescrita, ilustrada, y su estatus taxonómico revisado. Macroperipatus ohausi sólo se había recolectado en la localidad tipo, Petropolis, Estado de Rio de Janeiro, pero no se ha encontrado allí desde su descubrimiento. En 2009, recolectamos dos ejemplares de esta especie en un fragmento de la ‘Mata Atlantica’ en Nova Iguaçu en el RPPN de los Petroleiros (también en el estado de Rio de Janeiro). El color de los ejemplares nuevos fue interpretado y descrito, basado en el sistema NBS System/ISCC de designación de colores, y correspondió débilmente al descrito en publicaciones anteriores sobre M. ohausi. La identificación de M. ohausi se basó únicamente en su morfología, en comparación con la descripción original. Además, se examinó un sintipo hembra de M. ohausi depositado en Zoologisches Museum (Hamburgo). Nosotros reinvestigamos su morfología externa y concluimos que las papilas dorsales fueron mal interpretadas en M. ohausi en los estudios previos de su integumento. Los nuevos especímenes examinados son coespecíficos con M. ohausi principalmente por tener las papilas primarias cónicas, diferente tamaño de las papilas accesorias, y por el número de patas. Nuestro material se asemeja a la descripción original de M. ohausi, por ejemplo, la almohadilla espinosa y tubérculos nefridiales, aunque estas características no están representadas en la descripción original y redescripcion de M. ohausi, estas características también se detallan aquí. Llegamos a la conclusión de que la morfología de las papilas dorsales de M. ohausi, comparte caracteres de diagnóstico, por ejemplo, con los representantes de los géneros Peripatus y Epiperipatus. Las papilas dorsales son redondeadas y no cuadradas como en la descripción original y redescripción. Otro argumento que apoya nuestra conclusión es que la RPPN dos Petroleiros, la ubicación en la que se recogieron las nuevas muestras, pertenece a la misma cadena de montañas y al mosaico Atlántico, tal como el material original de M. ohausi. Por otra parte, se describe aquí por primera vez un macho de M. ohausi. Basado en nuestros datos morfológicos, transferimos esta especie al género Epiperipatus, que propone una nueva combinación, E. ohausi.

Gradients, stability and conservation status of fishes in the Andean mountain streams of the Orinoco versant, Venezuela

Most Andean mountain streams of the Orinoco Basin in Venezuela, had been suffering various disturbances. in spite of this, fish communities have been poorly evaluated in terms of spatial and temporal gradients. Thus, the generation of information about these communities is a priority, since it may support conservation of regional hydrobiological resources. For this, six sites were monthly evaluated in tributaries of upper Turbio River in Sierra de Portuguesa (770-1 305msnm), during the dry season and the beginning of the rainy season (January-April 2012); we characterized stream dimensions, substrate and water physicochemical variables. Electrofishing was used to determine the number and abundance of fish species. The fish communities and their stability were evaluated by exploring the changes in richness and abundance, coefficients of variation, hierarchical classification and non-metrical multidimensional scaling analysis. The sites conservation status was estimated with a habitat integrity index. Our results showed that richness of the 12 species found varied according to the mountain elevation, the tributaries and the conservation status of the sites. Chaetostoma dorsale, Creagrutus taphorni and Chaetostoma milesi comprised 90.8% of the relative abundance, and maintained the first ranks during the study period. The communities had little spatio-temporal variation which was associated with a gradient signed principally by the amount of shadow, rocks and gravel cover, water temperature and conductivity. Stability was moderate but varied with elevation and according to site conservation status. The tributaries in upper Turbio River were found to be under severe impacts and their fishes were found impoverished and at risk.

La mayoría de los ríos en las montañas andinas de Venezuela en la cuenca del Orinoco sufren variadas perturbaciones. A pesar de esto, sus comunidades de peces han sido poco evaluadas en términos de sus gradientes espaciales y temporales. La generación de información sobre estas comunidades es prioritaria, y puede impulsar la conservación de los recursos hidrobiológicos regionales. Con este fin, seis localidades fueron evaluadas mensualmente en tributarios de la cuenca alta del río Turbio en la Sierra de Portuguesa (770-1 305msnm) durante el período de sequía y el inicio del período de lluvias (enero-abril de 2012), se caracterizaron las dimensiones del cauce, el sustrato y las variables físico-químicas del agua. Se utilizó electropesca para determinar el número y abundancia de especies de peces. Las comunidades de peces y su estabilidad se evaluaron explorando los cambios en la riqueza y abundancia y por coeficientes de variación, clasificación jerárquica y análisis de escalamiento multidimensional no métrico. El estado de conservación de las localidades se estimó con un índice de integridad del hábitat. La riqueza de 12 especies varió según la elevación, los tributarios y el estado de conservación de las localidades. Chaetostoma dorsale, Creagrutus taphorni y Chaetostoma milesi comprendieron el 90.8% de la abundancia relativa y mantuvieron los primeros rangos durante el período. Las comunidades tuvieron poca variación espacio-temporal y esta se expresó en un gradiente asociado principalmente por las coberturas de sombra, rocas y grava, la temperatura del agua y la conductividad. La estabilidad fue moderada, variando con la elevación y el estado de conservación de las localidades. Los tributarios en la cuenca alta del río Turbio se encuentran bajo impactos severos y sus ictiofaunas son empobrecidas y en situación de riesgo.

Spermatozoa characterization in the one-sided livebearing Jenynsia multidentata (Cyprinodontiformes: Anablepidae)

Several sperm parameters have been employed as useful tools to evaluate fish fertility. Within teleosts, approximately 3% of fish species are known to be viviparous. The Order Cyprinodontiformes includes several species with internal fertilization, and within this group most of the studies about sperm quality have been mainly focused on the Poeciliidae family. The livebearing fish Jenynsia multidentata (Anablepidae) inhabits an extensive area of the Neotropical region and it has been used as a useful fish laboratory model to evaluate the effects of xenobiotics through different biomarkers. The present work characterized the sperm of this species through a simple protocol of semen collection. Sperm population showed linearity greater than 89% and 70% of fish have a straight line and curvilinear velocity valued between 50 and 100µm/s. Although 85% of individuals showed a proportion of live sperm higher than 60%, the male population had a high degree of heterogeneity in its sperm count. Morphometry analyses showed a total sperm and head lengths of 46.66±2.06µm and 3.46±0.41mm, respectively. A rather long midpiece region (9.12±0.65µm) was registered, which may indicate high energy-producing capabilities of the spermatozoa. This study established basic parameter values which could be useful for evaluating reproductive potential of J. multidentata populations.

Diversos parámetros espermáticos han sido utilizados para evaluar la fertilidad de peces. Dentro de los peces teleósteos, aproximadamente el 3% de las especies son vivíparas. El orden Cyprinodontiformes incluye varias especies con fecundación interna. Dentro de este orden la mayor parte de los estudios sobre la calidad del esperma se han centrado principalmente en la familia Poeciliidae. El pez vivíparo Jenynsia multidentata (Anablepidae) habita una extensa área de la región Neotropical y ha sido utilizado como un exitoso modelo de laboratorio. El objetivo del presente trabajo fue caracterizar los espermatozoides de esta especie a través de un simple protocolo de recolección de esperma. La población de espermatozoides mostró una linealidad superior al 89% y el 70% de los peces tienen una velocidad lineal y curvilineal entre 50 y 100µm/s. Aunque el 85% de los individuos mostró una proporción de espermatozoides vivos de más del 60%, se observó una alta heterogeneidad en el recuento espermático. Los análisis morfométricos mostraron una longitud total de espermatozoides de 46.66±2.06µm y una longitud de la cabeza de 3.46±0.41µm. Los espermatozoides presentan una pieza media larga (9.12±0.65µm) lo que puede indicar una alta capacidad de producción de energía. El presente estudio establece valores básicos de parámetros que pueden ser útiles para evaluar el potencial reproductivo de las poblaciones de J. multidentata.

Reproductive tactics optimizing the survival of the offspring of Cichlasoma orientale (Perciformes: Cichlidae)

High mortality rates have been observed in Teleost during early developmental stages, as well as great variations in reproductive tactics, which are related to adaptations towards environmental conditions and ecological niches for which different species have a specific response. The objective of this study was to describe reproductive tactics related to the survival of Cichlasoma orientale offspring, including aspects of body size, parental care, fecundity, oocyte size and spawning patterns. Samples were performed monthly from August 2011 to July 2013, in lentic and lotic environments at Curu river basin, Brazilian Northeastern semiarid region. Individual behavior (n=113) was observed underwater for over 50 hours by ad libitum sampling and focal-animal sampling. Collected individuals (males n=185, females n=95) were evaluated regarding the standard length, batch fecundity, oocyte size and spawning pattern. In females with mature ovaries, oocyte groups at different developmental stages were observed, these cells were counted and measured, and fecundity was estimated by the gravimetric method. Our results showed that the species displayed biparental care behavior and, on average, males were larger than females. Based on 46 ovaries, the average batch fecundity was 2 052±849 (range: 254-3 389). Standard length and batch fecundity were positively correlated, but no correlation was found between oocyte size and standard length. The maximum diameter observed in the most developed oocytes was 1.8mm. The observed distribution of oocyte size classes indicated synchronous oocyte development in three groups: previtellogenic, vitellogenic and mature, showing that C. orientale is a multiple spawner. Differences in the amount of oocytes among the three groups were observed, with the most developed group showing the smallest number of oocytes. The combination of low fecundity and large egg size is characteristic of demersal spawners due to a greater environmental stability. Multiple spawning increases chances of survival mainly because of increased fecundity per reproductive season, and the reduced competition among the offspring. We concluded that C. orientale makes a heavy investment in larval survival in detriment of the offspring number. Survival is favored by the large size of oocytes, large yolk reserve, biparental care and multiple spawning pattern.

Las altas tasas de mortalidad se han observado en teleósteos durante las etapas iniciales del desarrollo, así como una gran variación en las tácticas reproductivas, que están relacionados con adaptaciones a las condiciones ambientales y nichos ecológicos con cada especie que presenta una respuesta específica. El objetivo de este estudio fue describir las tácticas reproductivas relacionadas con la supervivencia de la descendencia de Cichlasoma orientale, incluyendo aspectos tales como el tamaño corporal, el cuidado parental, la fecundidad, el tamaño de los ovocitos y los patrones de desove. Las muestras se recolectaron mensualmente desde agosto 2011 hasta julio 2013, en ambientes lénticos y lóticos en la cuenca del río Curu, región semiárida del noreste de Brasil. El comportamiento individual (n=113) se observó bajo el agua durante más de 50 horas por un muestreo ad libitum y muestreo de grupos focales. Para los individuos recolectados (n=185 machos, hembras n=95) se evaluó: la longitud, la fecundidad por camada, el tamaño estándar de los ovocitos y el patrón de desove. En las hembras con ovarios maduros, se observó la cantidad de grupos de ovocitos en diferentes etapas de desarrollo y estas células fueron contadas y medidas y la fecundidad se estimadó por el método gravimétrico. Las especies muestran un comportamiento de cuidado biparental y, en promedio, los machos son más grandes que las hembras. Con base en 46 ovarios, la fecundidad promedio de lotes fue de 2 052±849 (254-3 389). Longitud estándar y fecundidad parcial se correlacionaron positivamente, pero no se encontró correlación entre el tamaño de los ovocitos y la longitud estándar. Los oocitos más desarrollados miden 1.8mm. La distribución observada de las clases de tamaño de los ovocitos indica desarrollo de los ovocitos sincrónico en tres grupos: pre-vitelogénicos, vitelogénicos y maduros, lo que demuestra que C. orientale es una especie con desova múltiple. Se observaron diferencias en la cantidad de ovocitos entre los tres grupos, con el grupo más desarrollada que muestra el menor número de ovocitos. La combinación de la baja fecundidad y gran tamaño del huevo es una característica de los reproductores demersales, debido a una mayor estabilidad del medio ambiente. Múltiples desoves aumenta las posibilidades de supervivencia, principalmente debido al aumento de la fecundidad por temporada reproductiva y reducción de la competencia entre la descendencia. Llegamos a la conclusión de que C. orientale hace una fuerte inversión en la supervivencia de las larvas en detri- mento del número de descendientes. La supervivencia se ve favorecida por el gran tamaño de los ovocitos, gran reserva de yema de huevo, cuidado biparental y patrón de desove múltiple.

Long-term (2002-2011) changes on Cetengraulis edentulus (Clupeiformes: Engraulidae) fisheries in Guanabara Bay, Brazil

C. edentulus accounts for the major fishery resource in Guanabara Bay, but there are only few studies about its captures.This study analyzed the long term changes on C. edentulus catches in Guanabara Bay, focusing especially on temporal variation on capture effort, boat storage temperature, and fish price and size.We assessed the 2002-2011 database of fish landings at the pier of Rubi S.A., with records of year, month, total catch (kg), number of fish per kg, boat storage temperature (oC), and price per kg to boat owner (US$). Those variables differed among years and months (ANOVA; p<0.01) with strong yearXmonth interactions for all, probably related to C. edentulus reproductive and recruitment seasons and environmental conditions of Guanabara Bay. Generalized additive models revealed that high C. edentulus catches were associated with few boat loadings of large-sized fishes, which were conserved in higher boat storage temperatures and attained high market prices. Our long-term study stressed that variations on C. edentulus fishery were related to changes on boat storage temperature, fish size, price paid per kg, and frequency of landings, and that these descriptors are correlated with C. edentulus ecological traits and high phytoplankton availability. Nevertheless, further studies should be performed to address whether less evident factors, such as the fluctuation of concurrent Sardinella brasiliensis stock, would explain the temporal dynamics of C. edentulus stocks in Guanabara Bay.

Cetengraulis edentulus se distribuye por todo el Atlántico Sur y es la especie más explotada comercialmente en la bahía de Guanabara, Brasil. Entre 2002-2011 se analizaron los desembarques pesqueros de la empresa Rubi S.A., las capturas totales (kg), número de peces por kg, temperatura de almacenamiento en la embarcación (°C) y el precio pagado por kg de C. edentulus al propietario de la embarcación (US$). Todas las variables difirieron entre años y meses (ANOVA, p<0.01), con interacciones años × meses significativas para todas, probablemente a causa de los períodos reproductivo y de reclutamiento de C. edentulus y a las condiciones ambientales de la bahía. Modelos aditivos generalizados indicaron que capturas más elevadas de C. edentulus estuvieron asociadas con un menor número de desembarques, pero de peces más grandes, los cuales fueron conservados a temperaturas más elevadas y obtuvieron precios más altos de mercado. Aunque los cambios en los descriptores estén relacionados con los atributos ecológicos de C. edentulus y la productividad del fitoplancton, se necesitan más estudios para investigar si otros factores, tales como la fluctuación de los stocks de Sardinella brasiliensis, pueden afectar la dinámica temporal de los stocks de C. edentulus en la bahía.

Avifauna in silvopastoral systems in the Mesoamerican Biological Corridor, Tabasco, México

Silvopastoral systems support local ecological and economical features as they enhance conservation of floral and faunal communities. As other animal communities, avifauna may be a good representative of habitat altera- tions, both as the species and functional levels. In order to attend the initiative of Mesoamerican Biological Corridor initiative (CBM) in the state of Tabasco, we studied the diversity of birds in two silvopastoral systems: scattered trees in pastures (ADP), and trees in boundary-hedgerows (AL). For this, we applied the fixed radius counting point method in three priority sites in Tabasco´s CBM during the dry and wet season of 2011, and a total of 56, 60 and 62 points were evaluated in Huimanguillo, Tenosique and Tacotalpa, respectively. We observed 2 084 individuals of 154 species (79-89% of expected diversity) and 36 bird families. We detected 92, 87 and 85 species in Huimanguillo, Tenosique and Tacotalpa, respectively, including 35 protected species, of which 23, 19 and 16 in each locality, respectively. All sites showed high diversity (H´≥3.20), low species dominance (D≥0.08) and high equitability (J≥0.77). Species composition showed differences between sites, being most similar Tacotalpa and Tenosique. Ten species were considered characteristic for sites. Although the silvopastoral system did contain protected species, the low diversity and the early successional character of the arboreal components were not attractive to frugivorous bird species. Diversification with native trees can improve the systems to create a complementary habitat and to increase landscape connectivity. The management of silvopastoral practices on cattle dominated landscapes in Tabasco could improve its ecological quality, and thus achieve the CBM´s objectives of biodiversity conservation combined with human economic activities.

Los sistemas silvopastoriles contienen rasgos ecológicos y económicos que contribuyen con la conservación de comunidades florísticas y faunísticas que en ellas se desarrollan. Entre otras comunidades faunísticas se encuentra la avifauna la cual es un grupo representativo de las alteraciones del habitat, tanto a nivel específico como grupo functional. Con el objetivo de atender la iniciativa de Corredor Biológico Mesoamericano en Tabasco, México, se analizó la diversidad de aves en dos sistemas silvopastoriles: árboles dispersos en potreros (ADP) y árboles en cercos o linderos (AL). Se aplicó el método de punto de conteo de radio fijo en tres sitios prioritarios del CBM de Tabasco, ubicados en los municipios: Huimanguillo, Tacotalpa y Tenosique. Los datos provienen de las estaciones seca y húmeda del 2011. Se registraron 2 084 aves de 154 especies (79-89% del esperado) y 36 familias. Se detectaron 92, 87 y 85 especies, incluyendo 35 protegidas, con 23, 19 y 16 en Huimanguillo, Tacotalpa y Tenosique, respectivamente. Todos los sitios mostraron alta diversidad (H’≥3.20), baja dominancia de especies (D≥0.08) y alta equidad (J≥0.77). La composición de especies mostró diferencias entre sitios, con mayor similitud entre Tacotalpa y Tenosique. Diez especies pueden considerarse características de los sitios. Aunque en los sistemas silvopastoriles se refugian aves protegidas, el componente arbóreo es poco diverso y corresponde a especies de sucesión secundaria temprana, lo que limita a las aves frugívoras y especialistas de bosque. Diversificar estos sistemas con árboles nativos puede mejorar estos hábitats complementarios e incrementar la conectividad del paisaje para cumplir con los objetivos del CBM en la conservación de la biodiversidad y provisión de bienes a las poblaciones humanas.

**Nesting habitat characterization for Amazona oratrix (Psittaciformes: Psittacidae) in the Central Pacific, Mexico**

The nesting requirements of the Yellow-headed Parrot (Amazona oratrix) are poorly understood, despite their broad historical distribution, high demand for pet trade and current endangered status. Information concerning their nesting requirements is required in order to design specific restoration and conservation actions. To assess this, we studied their nesting ecology in the Central Pacific, Michoacan, Mexico during a ten year period. The analyzed variables ranged from local scale nest site characteristics such as nesting tree species, dimensions, geographic positions, diet and nesting forest patches structure, to large scale features such as vegetation use and climatic variables associated to the nesting tree distributions by an ecological niche model using Maxent. We also evaluated the parrot tolerance to land management regimes, and compared the Pacific nest trees with 18 nest trees recorded in an intensively managed private ranch in Tamaulipas, Gulf of Mexico. Parrots nested in tall trees with canopy level cavities in 92 nest-trees recorded from 11 tree species. The 72.8% of nesting occurred in trees of Astronium graveolens, and Enterolobium cyclocarpum which qualified as keystone trees. The forests where the parrots nested, presented a maximum of 54 tree species, 50% of which were identified as food source; besides, these areas also had a high abundance of trees used as food supply. The lowest number of tree species and trees to forage occurred in an active cattle ranch, whereas the highest species richness was observed in areas with natural recovery. The nesting cavity entrance height from above ground of the Pacific nesting trees resulted higher than those found in the Gulf of Mexico. We hypothesize that the differences may be attributed to Parrot behavioral differences adapting to differential poaching pressure and cavity availability. Nesting trees were found in six vegetation types; however the parrots preferred conserved and riparian semi-deciduous forest for nesting, with fewer nests in deciduous forest, while nesting in transformed agricultural fields was avoided. The main climatic variables associated with the potential distribution of nests were: mean temperature of wettest quarter, mean diurnal temperature range, and precipitation of wettest month. Suitable climatic conditions for the potential presence of nesting trees were present in 61% of the region; however, most of the area consisted of tropical deciduous forests (55.8%), while semi-deciduous tropical forests covered only 17% of the region. These results indicated the importance to conserve semi-deciduous forests as breeding habitats for the Yellow-headed Parrot, and revealed the urgent need to implement conservation and restoration actions. These should include a total ban of land use change in tropical semi-deciduous forest areas, and for selective logging of all keystone tree species; besides, we recommend the establishment of wildlife sanctuaries in important nesting areas, and a series of tropical forest restoration programs in the Central Pacific coast. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1053-1072. Epub 2014 September 01.

Los requerimientos de anidación del loro cabeza-amarilla (Amazona oratrix) son poco conocidos a pesar de su amplia distribución histórica, la alta demanda como mascota y estar en peligro de extinción. Esta información es necesaria para diseñar acciones específicas de restauración y conservación. Durante diez años estudiamos la ecología de anidación del loro en Michoacán, México. Las variables estudiadas incluyeron en escala local las especies de árboles-nido, sus dimensiones y posición geográfica, dieta y estructura de parches de bosque; y a mayor escala el uso de la vegetación y las variables climáticas asociadas a la distribución de árboles-nido, obtenidas con un modelo de nicho ecológico utilizando Maxent. También evaluamos la tolerancia del loro al manejo de la tierra, y comparamos los árboles-nido encontrados, con 18 árboles-nido de Tamaulipas (Golfo de México), estudiados en los ochentas en un rancho privado intensamente manejado. Los loros anidaron en árboles altos en cavidades del dosel, registramos 92 árboles-nido en 11 especies de árboles, pero el 72.8% se presentó en Astronium graveolens y Enterolobium cyclocarpum que califican como árboles clave. Los bosques de anidación presentan 54 especies de árboles como máximo, y 50% sirven como alimento, también las zonas presentan alta abundancia de árboles dieta. La menor riqueza de árboles y de árboles dieta se presentó en un rancho ganadero, mientras que las áreas en regeneración natural presentaron mayor riqueza. La altura de la entrada de la cavidad en los árboles-nido del Pacífico fue mayor que en los del Golfo de México. Hipotetizamos que las diferencias se deben al comportamiento del loro, adaptado a la presión diferencial de saqueo de nidos y disponibilidad de cavidades. Los árboles-nido se encontraron en seis tipos de vegetación, pero el loro prefirió el bosque tropical subcaducifolio conservado, y ribereño, anidó menos en bosque tropical caducifolio y nunca en campos agrícolas transformados, difiriendo de lo esperado por la disponibilidad de hábitat. Las principales variables climáticas asociadas con la distribución potencial de nidos son: temperatura promedio del trimestre más lluvioso, oscilación diurna de la temperatura, y precipitación del mes más lluvioso. Las áreas de presencia potencial de árboles-nido representan el 61% de la región, sin embargo la mayor parte es bosque tropical caducifolio (55.8%), y el bosque tropical subcaducifolio sólo ocupa 17%. Los resultados indican la importancia del bosque tropical subcaducifolio conservado como hábitat de reproducción del loro cabeza-amarilla, y muestran la urgente necesidad de implementar acciones de conservación y restauración. Las acciones deben incluir la prohibición del cambio de uso del suelo del bosque tropical subcaducifolio, y de la tala selectiva de especies clave, la creación de santuarios de vida silvestre en las áreas de anidación y programas de restauración de los bosques tropicales de la costa del Pacífico central.

Seasonal dynamics of the shoreline vegetation in the Zapatosa floodplain lake complex, Colombia

Floodplain lakes and associated wetlands in tropical dry climates are controlled by pronounced and severe seasonal hydrologic fluctuations. We examined the plant community response to a bimodal flooding pattern in the Zapatosa Floodplain Lake Complex (ZFLC), Northern Colombia. We measured floristic and quantitative change in four sampling periods emphasizing seasonal differences in plant abundance and life-form structure. Of 79 species identified in the lake complex, 52 were used to characterize eight community types via classification and ordination procedures. Results showed that community structure does not change significantly during the flooding/receding stages. But maximum drawdown phase significantly disrupts the aquatic community structure and the exposed shorelines become colonized by ruderal terrestrial plants. Early rainfalls at the beginning of the wet season are emphasized as an important feature of plant regeneration and community development. The general strategy of the ZFLC vegetation can be framed into the flood pulse concept of river-floodplain systems. Thus, plant communities are mainly responding to disturbances and destruction events imposed by extreme water level fluctuations. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1073-1097. Epub 2014 September 01.

Las ciénagas y humedales asociados a sistemas fluviales en climas tropicales secos son controlados por fluctuaciones hidrológicas estacionales pronunciadas. En este trabajo se examinó la respuesta de la comunidad vegetal a un patrón bimodal de inundaciones en el complejo de ciénagas de Zapatosa (ZFLC), al norte de Colombia. Se estudiaron los cambios florísticos y cuantitativos de la vegetación en cuatro periodos de muestreo destacando diferencias estacionales en las abundancias y la estructura biotipológica de las plantas. De las 79 especies identificadas en el complejo lagunar, 52 se utilizaron para caracterizar ocho tipos de comunidades mediante tácticas multivariadas de clasificación y ordenación. Los resultados revelan que la estructura de las comunidades no cambia de manera significativa durante los periodos de inundación/sequía. Únicamente la época de máxima sequía altera la estructura de las comunidades acuáticas y el litoral expuesto es colonizado por plantas ruderales terrestres. Las precipitaciones iniciales al inicio de la temporada de lluvias se destacan como una característica importante para la regeneración de las plantas y el desarrollo subsiguiente de las comunidades. La estrategia de sobrevivencia general de la vegetación acuática del ZFLC puede enmarcarse en el concepto de pulso de inundación de los sistemas fluviales inundables. Por lo tanto las comunidades vegetales responden principalmente a los disturbios y la destrucción impuestos por las fluctuaciones extremas del nivel del agua.

Impact of traditionally managed forest units on the landscape connectivity of Sierra de Los Tuxtlas, Mexico

The ever-increasing establishment of landscape mosaics is expressed as a surrounding matrix of agricultural activities, which frames patches or remnants of the original vegetation cover. Conservation actions should be aimed to establish or to increase those interactive systems, which help to maintain the landscape flow through linkages. Spaces occupied by traditional management systems retain and support this function. In this paper, we used Geographic Information Systems to evaluate the importance of traditionally managed forest units (acahuales-coffee plantations) and to assess landscape connectivity in the indigenous Popoluca area of Sierra de los Tuxtlas, Mexico. The cartographic material used to establish the types of vegetation and their coverture included the period 1991-2008. At landscape level, four indices were used to assess the general situation of the habitat network, and to identify the patches of high priority. Individually, indices evaluated if patches were important for their area, their potential flow or their connecting function. Results showed that the landscape is functioning as a single system, but having low connectivity. Values improved when traditionally managed forest patches were considered as viable habitat. We detected 367 patches of very high priority, 80% belonging to forests managed traditionally. Patches were important for their potential flow (size and topological relationships). Only 70 patches were significant for their function as biological corridors between largest forests located at the top of the volcanoes, and are mostly managed forest (75%). We concluded that the units of traditionally managed forest play a significant role in landscape connectivity maintenance. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1099-1109. Epub 2014 September 01.

La existencia cada vez más frecuente de mosaicos de paisaje se expresa como una matriz circundante de actividades agropecuarias que enmarcan relictos de vegetación primaria. Cualquier acción de conservación debe de estar orientada a establecer o incrementar aquellos sistemas interactivos que mantengan los flujos del paisaje a través de enlaces. Los espacios ocupados por sistemas tradicionales de manejo favorecen y mantienen esta función. En el presente trabajo se evaluó, a través de un sistema de información geográfica, la importancia de las unidades de selva manejada de manera tradicional (acahuales-cafetales) en la conectividad del paisaje en la zona indígena Popoluca de la Sierra de los Tuxtlas, México. El material cartográfico utilizado para determinar los tipos de vegetación y su cobertura, abarca el periodo 1991-2008. Se emplearon cuatro índices para evaluar la conectividad a nivel paisaje y detectar cuáles son los fragmentos de muy alta prioridad para su mantenimiento. A nivel individual los índices evaluaron si los fragmentos son importantes por su área, por su flujo potencial o por su función conectora. Los resultados muestran que el paisaje funciona como un solo sistema, con baja conectividad. Los valores mejoran al incluirse la selva manejada como hábitat viable. Se detectaron 367 fragmentos de muy alta prioridad, 80% de ellos de selva manejada. Los fragmentos en su mayoría fueron importantes por el flujo potencial que representan (dimensiones y relaciones topológicas). Solo 70 fragmentos fueron importantes por su función como conectores, éstos actúan como corredores con las masas forestales de mayor tamaño localizadas en la cima de los volcanes, y son principalmente fragmentos de selva manejada (75%). Se concluye que las unidades de selva manejada de manera tradicional juegan un papel significante en el mantenimiento de la conectividad del paisaje.

Geoindicador de modificación de la cobertura aplicado a un ambiente costero tropical

Environmental changes due to natural processes and anthropic modifications can be characterized by the degree of land cover modification and its environmental implications over time. The main goal of the present study was to propose and apply a land cover modification geoindicator in order to assess the environmental condition of the territory per landscape units. It was designed to interpret diffuse information and transform it into a synthetic indicator that will be useful for environmental managers. The geoindicator evaluation was performed through a multi-temporal analysis of medium resolution Landsat satellite images and their unsupervised classification according to the direction of land use transitions. A change detection analysis between image pairs from 1973, 1991 and 2001 was made to detect unaffected areas and the areas in which positive or negative land cover changes could be observed. The proposed methodology was applied in the coastal palustrine area; specifically, in the marine-terrestrial ecotone of Campeche, Mexico. Geoindicator values during the 1974-1991 and 1991-2001 periods were low, 46.5% and 40.9%, respectively, due to the intrinsic limitations of coastal wetlands for productive activities. Urban and suburban transition areas showed high degrees of modification of about 39.5% and 32.1% for the first and the second period, respectively. Moderate modification, 4.9% in the first period and 5.7% in the second, was observed in isolated landscape units with recovering vegetation. The proposed geoindicator showed physiognomic and functional evidence of affectation levels from human activities, regeneration patterns and alteration of the landscape structure, modulated by the historical-economic process in the studied area. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1111-1128. Epub 2014 September 01.

Los cambios ambientales debidos tanto a procesos naturales como a las modificaciones antrópicas, se pueden caracterizar a través de la modificación de la cobertura y sus implicaciones ambientales en el tiempo. El objetivo del presente estudio es proponer y aplicar un geoindicador de modificación de la cobertura para evaluar la condición ambiental del territorio dentro del ámbito funcional de las unidades de paisaje. La evaluación del geoindicador se basa en el análisis multitemporal de imágenes de satélite Landsat de resolución espacial media y su clasificación no supervisada de acuerdo a la dirección tipificada de transiciones en el uso de la tierra. Incluye la detección de cambios entre pares de imágenes entre 1973, 1991 y 2001 para identificar áreas sin cambio y áreas en las que se observan cambios ambientales positivos o negativos con base en la cobertura. La metodología propuesta se aplicó en la zona costero-palustre de Campeche, México, y los valores encontrados durante los períodos 1974-1991 y 1991-2001 fueron: bajos, de 46.5% y 40.9%, respectivamente, debido a las limitaciones intrínsecas de los humedales costeros para las actividades primarias. Grados altos para las zonas de transición urbana y suburbana con 39.5% y 32.1% para el primero y segundo período, respectivamente. El grado de modificación moderado, oscila entre el 4.9% para el primer período y 5.7% para el segundo periodo, y se observó en unidades del paisaje en etapas sucesionales retrogresivas. El geoindicador propuesto muestra: evidencias fisonómicas directas y funcionales indirectas de la afectación a la cobertura original por las actividades humanas, los patrones dispersos de regeneración, la introducción de elementos alóctonos antrópicos y la artificialización del paisaje original.

Seed rain under native and non-native tree species in the Cabo Rojo National Wildlife Refuge, Puerto Rico

Seed dispersal is a fundamental process in plant ecology and is of critical importance for the restoration of tropical communities. The lands of the Cabo Rojo National Wildlife Refuge (CRNWR), formerly under agriculture, were abandoned in the 1970s and colonized mainly by non-native tree species of degraded pastures. Here we described the seed rain under the most common native and non-native trees in the refuge in an attempt to determine if focal tree geographic origin (native versus non-native) influences seed dispersal. For this, seed rain was sampled for one year under the canopies of four native and four non-native tree species common in this refuge using 40 seed traps. No significant differences were found for the abundance of seeds, or their diversity, dispersing under native versus non-native focal tree species, nor under the different tree species. A significantly different seed species composition was observed reaching native versus non-native focal species. However, this last result could be more easily explained as a function of distance of the closest adults of the two most abundantly dispersed plant species to the seed traps than as a function of the geographic origin of the focal species. We suggest to continue the practice of planting native tree species, not only as a way to restore the community to a condition similar to the original one, but also to reduce the distances needed for effective dispersal. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1129-1136. Epub 2014 September 01.

La dispersión de semillas es fundamental para la restauración de comunidades tropicales. Los terrenos del Refugio de Vida Silvestre de Cabo Rojo, anteriormente cultivado, fueron abandonados en los 70 y colonizados principalmente por árboles no-nativos. Describimos la lluvia de semillas debajo de las cuatro especies más comunes de árboles nativos y de las cuatro especies de árboles no-nativos de este refugio para evaluar si la procedencia del árbol influye en la dispersión de las semillas. Se recogieron semillas en 40 trampas de semillas; debajo de cinco individuos de cada especie. No encontramos diferencias significativas en abundancia de semillas o en su diversidad, tanto al comparar nativos versus no-nativos, como al comparar entre especies de árboles. Por otro lado, si se presentaron diferencias en la composición de semillas dispersadas debajo de nativos versus debajo de no-nativos. Sin embargo, encontramos evidencia de que ese último resultado pudo deberse más bien a la cercanía del adulto más cercano de la especie dispersada que a la procedencia de la especie de árbol estudiado. Sugerimos continuar la práctica de sembrar árboles nativos, tanto para restaurar la comunidad a una condición más similar a la original como para disminuir las distancias necesarias para una dispersión más efectiva.

Floral structure of two species of Trachycarpeae (Arecaceae)

Copernicia and Washingtonia are two genera of the Trachycarpeae for which no subtribal classification has been proposed, mainly because of the lack of resolution in phylogenetic studies. Morphology and anatomy of flowers whithin Coryphoideae have proven useful for taxa delimitation and supporting relationships among their members. A description of the morphological and anatomical structure of flowers of C. tectorum and W. filifera is presented in order to explore reproductive characters that may clarify their classification within the subfamily and to contribute with floral biology studies. Flowers of cultivated specimens of both taxa and developing fruits of C. tectorum were fixed in FAA, dissected for morphological analysis, and parafin-embedded flowers and fruits were serially sectioned for obtaining permanent slides, using conventional techniques and safranin-fast green staining. All procedures were carried out in the Laboratory of Morpho-Anatomy, Agronomy Faculty of the Universidad Central de Venezuela (UCV). Both species have hermaphroditic flowers. C. tectorum flowers have a thick and pubescent perianth, six stamens with filaments forming a tube fused to the corolla, with rounded projections and an acute apex where the anthers are inserted. W. filifera flowers have an irregularly dentate calyx, and a shortly acuminate corolla, six stamens united by their filaments to the corolla which at the same time are briefly fused to the gynoecium. Cells with druse crystals in the staminal tube are reported for C. tectorum. Only one of the carpels of the gynoecium of C. tectorum develops at fruit stage, and a layer of abundant raphide cells forming a crustaceous endocarp in mature fruits, was found. W. filifera presents the perianth mesophyll with few layers of thick walled cells and schlerenchymatic tissue, gynoecium with apically fused carpels in the ventral region of ovary, free at the base and the apex of the style, where the ventral sutures are opened. C. tectorum has a ventral hypodermis in the petals made of large and thick walled cells, gynoecium with apically fused carpels in the ovary, free and adpressed basally, style-stigma completely fused, and stylar transmission channel absent distally. Distinct stylar canals in C. tectorum, united distally in W. filifera confirm the close relationship between these species and subtribe Livistoninae. Also, some floral morpho-anatomical similarities (e.g. fleshy calyx base and a hypodermis with thickened cell walls in petals) were found between C. tectorum and Pritchardia, supporting the affinities between both genera. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1137-1146. Epub 2014 September 01.

Copernicia y Washingtonia son dos de los géneros de Trachycarpeae para los cuales no ha sido propuesta una clasificación subtribal debido a la carencia de resolución en los estudios filogenéticos. La morfología y anatomía floral dentro de Coryphoideae han sido útiles para la delimitación de taxones y apoyo de relaciones. En este trabajo se presenta una descripción de la estructura morfo-anatómica de las flores de C. tectorum y W. filifera, con la finalidad de explorar caracteres reproductivos que puedan aclarar su ubicación dentro de la subfamilia y contribuir con estudios de biología floral. Se fijaron flores de especimenes cultivados de ambos taxones y frutos en desarrollo de C. tectorum, se realizaron disecciones para las descripciones morfológicas y cortes anatómicos seriados para la obtención de láminas permanentes utilizando técnicas convencionales con parafina. Todos los procedimientos fueron llevados a cabo en el Laboratorio de Morfo-Anatomía, Facultad de Agronomía de la Universidad Central de Venezuela (UCV). Ambas especies tienen flores hermafroditas. Las flores de C. tectorum tienen perianto engrosado y pubescente. Las flores de W. filifera presentan un cáliz irregularmente dentado y corola corto-acuminada. Se reportan células con drusas en el tubo estaminal de C. tectorum. Uno solo de los carpelos de C. tectorum se desarrolla en fruto y se encontró una capa de células con rafidios que podrían formar el endocarpo crustáceo en los frutos maduros. W. filifera presenta pocas capas de células de paredes engrosadas y tejido esclerenquimático en el mesofilo del perianto, gineceo con carpelos fusionados en el ápice del ovario (en su porción ventral), libres en la base y en el ápice del estilo, donde presenta suturas ventrales abiertas. Los pétalos de C. tectorum poseen una hipodermis ventral de células con paredes muy engrosadas, gineceo con carpelos fusionados en el ápice del ovario, libres y adpresos en su base, región estilar-estigmática fusionada y canal de transmisión estilar ausente distalmente. La presencia de canales estilares separados en C. tectorum, unidos distalmente en W. filifera confirman la relación cercana de estas especies con la subtribu Livistoninae. Igualmente, se encontraron algunas similitudes entre C. tectorum y Pritchardia (p.e. base carnosa del cáliz y epidermis ventral con células de paredes engrosadas en los pétalos), apoyando ciertas afinidades entre ambos géneros.

Anatomy and development of stamens and carpels of Drimys granadensis (Winteraceae)

Winteraceae has long been considered a family with early diversification among angiosperms, with characters such as: flowers with many spirally arranged parts and apocarpic ovary formed by plicated carpels with sessile stigma. In Drimys, the presence or absence of conspicuous glands on the connective of the stamens have been used as a taxonomic character, and it is considered a synapomorphy for the clade including Drimys angustifolia, D. brasiliensis, D. granadensis and D. roraimensis (Northeastern clade); however, the anatomy of stamens and carpels has only been studied in detail for D. winteri (Southwestern clade). In this research, the presence and the structure of glands on the connective of stamens was studied in seven species of the genus from herbarium specimens, and a detailed study of the anatomy and development of stamens and carpels was carried out by scanning electron and optic microscopy in Drimys granadensis. We found similarities between D. granadensis and D. winteri for the following characters: Basic type anther wall formation, secretory tapetum that collapses at maturity, intermediate type microsporogenesis with formation of a transient cell plate in telophase I, ascidiated carpel due to the formation of an adaxial lip during development, stigma closed by interdigitation of epidermal cells. We also determined that the large glands on anther mature connective are originated by an overgrowth of subepidermal oil cells; this character is a Northeastern Drimys clade synapomorphy, while it was absent in both Drimys of Southwestern clade (which includes D. andina, D. confertifolia and D. winteri), and the rest of the Winteraceae. We are proposing the hypothesis that the highly variable enviromental conditions in the tropics where Drimys Northeastern clade is distributed, with a wide range of pollinators, would be associated with the emergence of glandular conspicuously stamens; while, as a prediction to be confirmed, temperated Southwestern clade species, without conspicuous glands, should have a smaller range of visitors and/or pollinators, or even be anemophilous species as Drimys confertifolia. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1147-1159. Epub 2014 September 01.

La familia Winteraceae ha sido tradicionalmente considerada como de diversificación temprana entre las angiospermas por varios caracteres, entre ellos: flores con muchas partes distribuidas en espiral y ovario apocarpico formado por carpelos de tipo plicado con estigma sésil. En el género Drimys, la presencia o ausencia de glándulas conspicuas sobre el conectivo de los estambres ha sido usado como un carácter taxonómico, y su presencia se considera como una sinapomorfía del clado formado por Drimys angustifolia, D. brasiliensis, D. granadensis and D. roraimensis (clado nororiental); sin embargo, la anatomía de estambres o carpelos ha sido solamente estudiada en detalle en D. winteri (clado suroccidental). En esta investigación, la presencia y estructura de las glándulas del conectivo fue estudiada en las siete especies del género Drimys a partir de ejemplares de herbario, además, se realizó un estudio detallado de la anatomía y desarrollo de estambres y carpelos de Drimys granadensis empleando microscopía óptica y microscopía de barrido; y se compararon con los resultados previos en Drimys winteri. Se encontraron similitudes en los siguientes caracteres: formación de la pared de la antera de tipo básico, tapetum secretor que colapsa en la madurez, microsporogénesis de tipo intermedio con formación de una placa celular transitoria en telofase I, carpelo ascidiado debido a la formación de un labio adaxial durante el desarrollo, estigma cerrado por interdigitación de células epidérmicas. Se determinó que las glándulas de gran tamaño sobre el conectivo de la antera madura se originaron por sobrecrecimiento de células oleíferas subepidérmicas, siendo una sinapomorfía del clado nororiental, que esta ausente tanto en el clado suroccidental de Drimys (D. andina, D. confertifolia y D. winteri), como en el resto de la familia. Se propone la hipótesis de que las condiciones altamente variables en las zonas tropicales donde se distribuye el clado nororiental de Drimys, con una amplia gama de polinizadores, estarían asociadas al surgimiento de estambres conspicuamente glandulares; en tanto que proponemos como predicción que las especies circunscritas a la zona templada del Sur de Suramérica (Clado suroccidental), sin glándulas conspicuas, deberían presentar una menor variedad de visitantes y/o polinizadores, o incluso ser especies anemófilas como Drimys confertifolia.

Sporogenesis, sporoderm and mature spore ornamentation in Lycopodiaceae

Studies on reproductive aspects, spore morphology and ultrastructure of Lycopodiaceae are not very common in the scientific literature, and constitute essential information to support taxonomic and systematic relationships among the group. In order to complete existing information, adding new and broader contributions on these topics, a comparative analysis of the sporogenesis ultrastructure, with emphasis on cytological aspects of the sporocyte coat development, tapetum, monoplastidic and polyplastidic meiosis, sporoderm ontogeny and ornamentation of the mature spores, was carried out in 43 taxa of eight genera of the Lycopodiaceae: Austrolycopodium, Diphasium, Diphasiastrum, Huperzia (including Phlegmariurus), Lycopodium, Lycopodiella, Palhinhaea and Pseudolycopodiella growing in the Andes of Colombia and the Neotropics. For this study, the transmission electron microscopy (TEM) samples were collected in Cauca and Valle del Cauca Departments, while most of the spores for scanning electron microscopy (SEM) analysis were obtained from herbarium samples. We followed standard preparation procedures for spore observation by TEM and SEM. Results showed that the sporocyte coat is largely composed by primary wall components; the sporocyte develop much of their metabolic activity in the production of their coat, which is retained until the spores release; protective functions for the diploid cells undergoing meiosis is postulated here for this layer. The abundance of dictyosomes in the sporocyte cytoplasm was related to the formation and development of the sporocyte coat. Besides microtubule activity, the membrane of sporocyte folds, associated with electrodense material, and would early determine the final patterns of spore ornamentation. Monoplastidic condition is common in Lycopodium s.l., whereas polyplastidic condition was observed in species of Huperzia and Lycopodiella s. l.. In monoplastidic species, the tapetum presents abundant multivesicular bodies, while in polyplastidic species, the secretory activity of the tapetum is less intense. Sporoderm development is centripetal, exospore is the first formed layer, then the endospore and, if present, perispore is the final deposited layer. Adult spores of the Lycopodiaceae showed two patterns of ornamentation: negative or caviform (foveolate spores) and positive or muriform ornamentation, the latter with two subtypes (rugate and reticulate spores). The spores of Huperzia are characteristically foveolate, the rugate spores were found in a few species of Huperzia and in all of the Lycopodiella s. l. taxa studied, while Lycopodium s.l. spores bear reticulate ornamentation. Numerous ornamentation traits are diagnostic at the specific level. The types of ornamentation found do not support the recent extreme fragmentation of the family in several genera, but could match, a priori, with the idea of three subfamilies. The findings of sporogenesis, extremely similar in all taxa studied, point more to consider fewer genera, more comprehensive, than the recent, markedsplitting of the family. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1161-1195. Epub 2014 September 01.

Estudios sobre aspectos reproductivos, morfología y ultraestructura de las esporas de Lycopodiaceae no son abundantes en la literatura científica y constituyen información esencial para apoyar las relaciones taxonómicas y sistemáticas en el grupo. Con el fin de completar la información existente, añadiendo contribuciones nuevas y más amplias sobre estos temas, se realizó un análisis comparado de la ultraestructura de la esporogénesis, con énfasis en aspectos citológicos que tienen que ver con la formación de la cubierta de los esporocitos, el tapete, las meiosis monoplastidial y poliplastidial, la ontogenia del esporodermo y la ornamentación de las esporas maduras en 43 táxones de ocho géneros de Lycopodiaceae: Austrolycopodium, Diphasium, Diphasiastrum, Huperzia (incluyendo Phlegmariurus), Lycopodium, Lycopodiella, Palhinhaea y Pseudolycopodiella que crecen en los Andes de Colombia y el Neotrópico. Para estudios con microscopía electrónica de trasmisión (MET) las muestras se recolectaron en los departamentos de Cauca y Valle del Cauca, mientras que la mayoría de las muestras para microscopía electrónica de barrido (MEB) provienen de material herborizado de colecciones. Para la observación de las muestras con MET y MEB se utilizaron protocolos estándar para el procesamiento de esporas. La cubierta de los esporocitos está formada por pared primaria; los esporocitos invierten gran parte de su actividad metabólica en la producción de esa cubierta, que es mantenida hasta la liberación de las esporas y tiene funciones de protección de las células que harán meiosis. La abundancia de dictiosomas en los esporocitos se relacionó con la formación y desarrollo de la cubierta. Además de la actividad de los microtúbulos, la presencia de sinuosidades y plegamientos asociados con material electro denso en la membrana de los esporocitos determinarían tempranamente los patrones de ornamentación de las esporas. La condición monoplastidial es común en Lycopodium s.l.y la poliplastidial se observó en Huperzia y Lycopodiella s. l. En especies monoplastidiales el tapete presenta abundantes cuerpos plurivesiculares, en las poliplastidiales la actividad secretora del tapete es menos intensa. El desarrollo del esporodermo es centrípeto, el exosporio se forma primero, seguido del endosporio y el perisporio, si está presente, se deposita de último. En las esporas adultas de Lycopodiaceae se encontraron dos patrones de ornamentación: negativo o caviforme (esporas foveoladas) y positivo o muriforme (esporas rugadas y reticuladas). Las esporas foveoladas son características de Huperzia; las rugadas de unas pocas especies de Huperzia y las especies de Lycopodiella s. l., mientras que las reticulada son típicas de Lycopodium s. l.. Numerosos caracteres de la ornamentación resultan diagnósticos en el nivel específico. Los tipos principales no apoyan la extrema fragmentación reciente de la familia en varios géneros, aunque podría coincidir, a priori, con la idea de tres subfamilias. Los hallazgos de la esporogénesis, extremadamente similar en todos los táxones estudiados, apuntan más a la unificación de los géneros en la familia que a su segregación.

**Delimitation of some neotropical laccate Ganoderma (Ganodermataceae): molecular phylogeny and morphology**

Ganoderma includes species of great economic and ecological importance, but taxonomists judge the current nomenclatural situation as chaotic and poorly studied in the neotropics. From this perspective, phylogenetic analyses inferred from ribosomal DNA sequences have aided the clarification of the genus status. In this study, 14 specimens of Ganoderma and two of Tomophagus collected in Brazil were used for DNA extraction, amplification and sequencing of the ITS and LSU regions (rDNA). The phylogenetic delimitation of six neotropical taxa (G. chalceum, G. multiplicatum, G. orbiforme, G. parvulum, G. aff. oerstedtii and Tomophagus colossus) was determined based on these Brazilian specimens and found to be distinct from the laccate Ganoderma from Asia, Europe, North America and from some specimens from Argentina. Phylogenetic reconstructions confirmed that the laccate Ganoderma is distinct from Tomophagus, although they belong to the same group. The use of taxonomic synonyms Ganoderma subamboinense for G. multiplicatum, G. boninense for G. orbiforme and G. chalceum for G. cupreum was not confirmed. However, Ganoderma parvulum was confirmed as the correct name for specimens called G. stipitatum. Furthermore, the name G. lucidum should be used only for European species. The use of valid published names is proposed according to the specimen geographical distribution, their morphological characteristics and rDNA analysis. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1197-1208. Epub 2014 September 01.

Ganoderma incluye especies de gran importancia económica y ecológica, sin embargo, su nomenclatura actual es caótica y poco estudiada en el neotrópico. En este estudio se utilizaron 14 muestras de Ganoderma y dos de Tomophagus recolectados en Brasil para la extracción de ADN, amplificación y secuenciación de las regiones ITS y LSU. La delimitación filogenética de seis táxones neotropicales fue discutida con base en especímenes brasileños y secuencias del GenBank. Estas especies mostraron ser distintas de los Ganoderma lacados de Asia, Europa, América del Norte y de algunos ejemplares de Argentina. Las reconstrucciones filogenéticas confirman que los Ganoderma lacados son distintos de Tomophagus, aunque pertenecen al mismo grupo. No se confirman los sinónimos de G. subamboinense a G. multiplicatum, de G. boninense a G. orbiforme y G. chalceum a G. cupreum. G. parvulum se confirma como el nombre correcto para G. stipitatum. G. lucidum sólo se debe utilizar para especies europeas. Por lo tanto, se propone el uso de nombres publicados válidamente de acuerdo con la distribución geográfica de las muestras, características morfológicas y análisis de ADNr.

Pollen morphology of Vochysiaceae tree species in the State of Santa Catarina, Southern Brazil

Tropical Vochysiaceae includes mainly trees, and also shrubs and subshrubs. Three genera and seven species are present in the Brazilian state of Santa Catarina. The pollen morphology of six species of trees, belonging to three genera of the Vochysiaceae A. St-Hil. family, was studied. Herbaria samples were obtained, processed and treated by standard methods. The pollen grain morphology of Callisthene, Qualea and Vochysia is distinct. Medium sized pollen grains occur in Vochysia species, and small ones in Callisthene and Qualea. Specific characteristics were considered at species level [C. castellanosii H. F. Martins, C. kuhlmannii H. F.Martins, Qualea cordata Spreng var. cordata, Q. cryptantha (Spreng) Warm. var. cryptantha, Vochysia magnifica Warm. and V. tucanorum Mart.]. The presence of a fastigium (vestibulum) and a thin space devoid of nexine fixing the boundary of the apertural area is characteristic of Qualea and Vochysia species only. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1209-1215. Epub 2014 September 01.

Las Vochysiaceae tropicales incluyen principalmente árboles, arbustos y subarbustos. Tres géneros y siete especies están presentes en el estado brasileño de Santa Catarina. La morfología del polen de las seis especies de árboles, pertenecientes a tres géneros de la Vochysiaceae A. St.- Hil . familia, fue considerado en el presente trabajo. La morfología de los granos de polen de Callisthene Mart., Qualea Aubl. y Vochysia (Aubl.) Juss. es distinta. Los granos de polen de tamaño medio se producen en las especies de Vochysia y pequeños en Callisthene y Qualea. Características particulares fueron considerados a nivel de especie [C. castellanosii H.F. Martins, C. kuhlmannii H.F. Martins, Qualea cordata Spreng var. cordata, Q. cryptantha (Spreng) Warm. var. cryptantha, Vochysia magnifica Warm. and V. tucanorum Mart.]. La presencia de un fastigium (vestibulum) y de un espacio delgado que carece de nexina limita la zona apertural y es característica solo de las especies de Qualea y Vochysia.

Morphology and anatomy of caulinar axes, lycophylls and sporangia of Phlegmariurus phylicifolius: a contribution to the systematics of Neotropical Lycopodiaceae

Phlegmariurus is the only genus of Lycopodiaceae with the species grouped in 22 informal groups. Species level relationships within Phlegmariurus are poorly understood and their circumscriptions require a thorough molecular and morphological review. A detailed study of morphology and anatomy of caulinar axes, lycophylls and sporangia of Phlegmariurus phylicifolius was carried out in order to contribute to the elucidation of species circumscription in the informal group Phlegmariurus phlegmaria. Small pieces of caulinar axes bearing trophophylls, sporophylls and sporangia were fixed, dehydrated, Histowax (paraffin) embedded, sectioned in a rotatory microtome, and stained using the common Safranin O-Fast Green technique; handmade cross sections were also made and stained with the same technique. P. phylicifolius includes slender, pendulous plants up to 40cm long. Shoots heterophyllous, in the basal divisions ca. 10-20(-25)mm in diameter including the trophophylls, then abruptly constricted to (l-) 1.5-2(-2.5)mm in diameter including the imbricate, reduced sporophylls. Trophophylls are borne in alternating whorls of three, or decussate, subdecussate, or alternate, widely spaced in alternate leaved caulinar axes portions, perpendicular to the caulinar axes to falcately ascending, lanceolate to linear-lanceolate, with flat to slightly revolute margins. Each lycophyll is supplied by a single central vascular bundle, connected to a protoxylem pole in the stele. At the site of leaf-trace departure, no leaf (lycophyll) gap is present. Caulinar axes excluding leaves 0.7-1.2mm thick at the base, upward tapering to ca. 0.5mm. Caulinar axes present unistratified epidermis and endodermis, the cortex is characterized by the presence of a trabecular structure of lisigenous origin formed in the parenchimatous tissue next to the endodermis. The vascular tissue occupies the central part of the caulinar axes, forming a plectostele of subradiate organization, with five poles of protoxylem. The epidermal cells present sinuous anticlinal walls; invaginations in the inner side of external periclinal wall of the epidermal cells could be probably adaptive morphological feature of a water deficient environment. Leaves of constricted terminal divisions are decussate, or subdecussate, continuously or discontinuously sporangiate, appressed, abaxially rounded to carinate, widely lanceolate to widely ovate or subcordate, acute to mucronate or cuspidate, shorter than the sporangia. Each sporangium originates from a group of epidermal cells, axilar to the sporophylls. The cell walls of epidermal cell of the sporangia are Huperzioideae type. The morphological studies of trophophylls contribute to confirm the differences between P. phylicifolius and P. subulatus. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1217-1227. Epub 2014 September 01.

Phlegmariurus es el único género de Lycopodiaceae con las especies reunidas en 22 grupos informales. Las relaciones a nivel de especie dentro de Phlegmariurus están pobremente estudiadas y la circunscripción de las mismas requiere profundos exámenes moleculares y morfológicos. Se ha llevado a cabo un estudio detallado de la morfología y la anatomía de ejes caulinares, licofilos y esporangios de P. phylicifolius, con el fin de contribuir al esclarecimiento en la delimitación de las especies en el grupo Phlegmariurus phlegmaria. Segmentos de ejes caulinares con trofofilos, esporofilos y esporangios fueron fijados, deshidratados, incluidos en Histowax (parafina), cortados con un micrótomo rotatorio y coloreados usando la técnica tradicional Safranina O-Verde Rápido; además se hicieron cortes a mano alzada y se colorearon con la misma técnica. P. phylicifolius incluye plantas colgantes y péndulas de hasta 40cm de longitud. Los ejes son heterofilos, de aproximadamente 10-20(-25)mm de diámetro en las divisiones basales incluyendo los trofofilos, luego abruptamente reducidos a (l-) 1.5-2(-2.5)mm de diámetro incluyendo los esporofilos reducidos e imbricados. Los trofofilos están dispuestos en anillos alternantes de a tres, o decusados, subdecusados o alternos, dispuestos en forma espaciada en los ejes caulinares, perpendiculares al tallo hasta falcadamente ascendentes, lanceolados a lineal-lanceolados, con márgenes lisos o levemente revolutos. Cada licofilo está provisto de un haz vascular simple y central, conectado a un polo de protoxilema de la estela y sin laguna foliar. Los tallos poseen un ancho de 0.7-1.2mm en la base, excluyendo los licofilos, estrechándose hasta cerca de 0.5mm hacia el ápice. Los ejes caulinares presentan una epidermis uniestratificada y endodermis, la corteza se caracteriza por la presencia de una estructura trabecular de origen lisígeno formada en el tejido parenquimático próximo a la endodermis. El tejido vascular ocupa la parte central del eje caulinar, formando una plectostela de organización subradiada, con cinco polos de protoxilema. Las células epidérmicas presentan paredes anticlinales sinuosas; las invaginaciones en la cara interna de la pared periclinal externa podrían ser probablemente un característica morfológica adaptativa a un ambiente con períodos de sequía. Las hojas de las porciones apicales son decusadas o subdecusadas, con esporangio de disposición continua o discontinua, adpresas, abaxialmente redondeadas a carinadas, ampliamente lanceoladas a ovadas o subcordadas, ápice agudo a mucronado o cuspidado, más corto que el esporangio. Cada esporangio se origina de un grupo de células epidérmicas, en la axila de los esporofilos con el eje caulinar. Las paredes celulares de las células epidérmicas del esporangio son de tipo Huperzioideae. El estudio de la morfología de los trofofilos contribuye a confirmar las diferencias entre P. phylicifolius y P. subulatus.

Anti-leishmanial activity in plants from a Biological Reserve of Costa Rica

Leishmaniosis is an important human disease very difficult to treat. For this reason, many researchers in the world have been looking for anti-leishmanial chemical components present in several plant species. In Costa Rica, since no studies have been done in this field, this work aimed at the search of active chemical components in local plants that may have an activity against Leishmania sp. A total of 67 plants were selected from the Alberto Manuel Brenes Biological Reserve (REBAMB). For these collected plants, fresh or dried hidroalcoholic extracts of root, stem, mature or young leaves, flowers, and immature or mature fruits, were prepared under conventional methods. All extracts were tested for their effectagainst a strain of Leishmania (OCR with known characteristics). Firstly, by presumptive tests, we selected only those with some activity, and then, more specific studies were done to determine the IC50 in µg/mL; a promising plant was considered only if at least one of its parts presented an IC50<100µg/mL. Under this parameter, the following active plants were obtained and their lowest and highest IC50 obtained values presented (µg/mL): Bocconia frutescens (0.6 and 66.7), Clematis dioica (27.5 and 44.4), Cordia megalantha (80.0), Eugenia austin-smithi (90.6), Guarea bullata (98.8), Guateria tonduzii (44.4 and 66.3), Mikania holwayana (45.0 and 95.6), Nectandra membranacea (44.5 and 58.6), Neurolaena lobata (25.0 and 100.0), Persea povedae (76.9), Piper auritum (60.0), Rollinia pittieri (43.1), Solanum arboreum (25.8 and 72.5), Tetrorchidium euryphyllum (53.8 and 95.0), Witheringia solanacea (15.9 and 98.1) and Zanthoxylum juniperinum (23.4 and 97.5). Although the parasitic effect of fresh or dried extracts were almost similar, the fresh material slightly showed better results. That anti-parasitic effect occurred in one or more than four parts of the plant.Most of the active extracts did not produce lysis and aglutination which indicates a low toxicity. Since the species studied are different from those analyzed by other authors, we discuss the importance of these new findings, in relation to the new scientific knowledge, and the possible use of these plants as a leishmaniosis treatment. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1229-1240. Epub 2014 September 01.

La leishmaniosis es una enfermedad muy importante para el ser humano pero su tratamiento es bastante difícil. Por esta razón muchos investigadores han venido buscando plantas que contengan componentes químicos activos contra esta parasitosis. En Costa Rica no se tienen estudios al respecto y por eso el objetivo de este estudio fue la búsqueda de componentes activos contra Leishmania sp. en plantas de Costa Rica; 67 especies de la Reserva Biológica Alberto Manuel Brenes (REBAMB) fueron seleccionadas para realizar este trabajo. Para ello se prepararon extractos crudos hidro-alcohólicos de material fresco o desecado de raíz, tallo, hojas maduras o tiernas, flores y frutos inmaduros o maduros. Usando pruebas presuntivas y luego específicas, se analizó el efecto de tales extractos sobre una cepa de Leishmania (OCR). Se consideraron plantas promisorias solamente aquellas en que al menos una de sus partes presentara un CI50<100µg/mL. Las plantas seleccionadas fueron: Bocconia frutescens, Clematis dioica,Cordia megalantha, Eugenia austin-smithii, Guarea bullata, Guateria tonduzii, Mikania holwayana, Nectandra membranacea,Neurolaena lobata, Persea povedae, Piper auritum, Rollinia pittieri, Solanum arboreum, Tetrorchidium euryphyllum, Witheringia solanacea y Zanthoxylum juniperinum. Existió una ligera tendencia de positividad mayor para los extractos frescos y la actividad se presentó en una y hasta más de cuatro partes de la planta. La mayoría de los extractos activos no fueron tóxicos. Se discute la importancia de estos nuevos hallazgos, en relación con el nuevo conocimiento científico y su proyección en el tratamiento de la leishmaniosis.

Microbial diversity and digestive enzyme activities in the gut of earthworms found in sawmill industries in Abeokuta, Nigeria

The growing demand for wood has resulted in large volumes of wood wastes that are daily released to the soil from the activities of sawmills in South-Western Nigeria. In an attempt to setup a bioremediation model for sawdust, this study therefore aimed at evaluating microbial diversity, and the level of digestive enzymes in the gut of earthworms (Eudrilus eugeniae, Libyodrilus violaceous and Hyperiodrilus africanus) of sawmill origin. Four major sawmills located in Abeokuta (7o912 N - 3o1935 E), namely Lafenwa, Sapon, Isale-Ake and Kotopo sawmills were used for this study. The arboretum of the Federal University of Agriculture, Abeokuta was used as control. Gut microbial analysis was carried out using the pour-plate method while digestive enzyme activities in the earthworm guts were done by the spectrophotometric method. Higher microbial counts (28.5±0.1x10³-97.0±0.1x10³cfu for bacteria and 7.0±0.1x10³-96.0±0.1x10³cfu for fungi) and microbial diversity were recorded in the gut of earthworms of the sawmill locations than those of the control site (17.5±0.1x10³cfu for bacteria and 4.5±0.1x10³cfu for fungi). Streptococcus mutans and Proteus spp.were common in the gut of E. eugeniae, and L. violaceous from the study sawmills, while Streptococcus mutans were also identified in H. africanus, but absent in the gut of E. eugeniae from the control site. Cellulase (48.67±0.02mg/g) and lipase (1.81±0.01mg/g) activities were significantly higher (p<0.05) in the gut of earthworms from the control site than those of the study sawmills. Furthermore, amylase (α and β) activity was highest in the gut of earthworms from the sawmills. Variations observed in the gut microbial and digestive enzyme activities of earthworms from the study sawmills as compared to the control site suggests that earthworms, especially E. eugeniae, could be a better organism for use as bioremediator of wood wastes. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1241-1249. Epub 2014 September 01.

La creciente demanda de madera ha resultado en grandes volúmenes de residuos de madera que se lanzan diariamente a la tierra, procedentes de las actividades de los aserraderos en el suroeste de Nigeria. Se realizó este estudio en un intento de configurar un modelo de biorremediación de aserrín, con el objetivo de evaluar la diversidad microbiana y el nivel de las enzimas digestivas en el intestino de las lombrices de tierra (Eudrilus eugeniae, Libyodrilus violáceo y Hyperiodrilus africanus) de origen aserradero. Para este estudio se utilizaron cuatro grandes aserraderos ubicados en Abeokuta (7°912 N - 3°1935 E), a saber: Lafenwa, Sapon, Isale-Ake y Aserraderos Kotopo. El arboreto de la Universidad Federal de Agricultura, Abeokuta se utilizó como control. El análisis microbiano se llevó a cabo utilizando el método de vertido de placa, mientras que las actividades de enzimas digestivas en los intestinos de las lombrices se realizaron por el método espectrofotométrico. Los recuentos microbianos más altos fueron 28.5±97.0±0.1x10³-0.1x10³cfu para las bacterias y 7.0±0.1x10³-96.0±0.1x10³cfu para los hongos y la diversidad microbiana registrada en el intestino de las lombrices de tierra de los lugares de aserraderos y las del sitio de control fueron: 17.5±0.1x10³cfu para bacterias y 4.5±0.1x10³cfu para hongos. Streptococcus mutans y Proteus spp. eran comunes en el intestino de E. eugeniae, y L. violaceous de los aserraderos de estudio, mientras que también se identificaron Streptococcus mutans en H. africanus, que estuvieron ausentes en el intestino de E. eugeniae en el sitio de control. Actividades de celulasa (48.67±0.02mg/g) y lipasa (1.81±0.01mg/g) fueron significativamente mayores (p<0.05) en el intestino de las lombrices de tierra en el sitio de control que las de los aserraderos de estudio. Por otra parte, la actividad de la amilasa (α y β) fue mayor en el intestino de las lombrices de tierra de los aserraderos. Las variaciones observadas en la microbiota intestinal y la actividad de las enzimas digestivas de las lombrices de tierra de los aserraderos de estudio, en comparación con el sitio de control, sugieren que las lombrices de tierra, especialmente E. eugeniae, podrían ser un mejor organismo para su uso como biorremediador de residuos de madera.

The morphology and bioactivity of the rice field cyanobacterium Leptolyngbya

The genus Leptolyngbya comprises filamentous cyanobacteria that are important in rice fields. In the rhizosphere, cyanobacteria produce a variety of secondary metabolites such as auxins that are important in agriculture soil performance. To assess this, Leptolyngbya strain MMG-1, was isolated from the rhizosphere of rice plants and described. For this, the morphology of this strain was studied by light microscopy as well as by confocal laser scanning microscopy. Besides, the ability of this strain to synthesize an auxin-like bioactive compound was demonstrated under various culture conditions (different amounts of tryptophan; pH; different alternating light:dark periods; duration of the incubation). The auxin-like compound was extracted from the culture of Leptolyngbya strain MMG-1 and identified as indole-3-acetic acid (IAA) by thin layer chromatography (TLC) as well as by high performance liquid chromatography (HPLC). Our results showed that the strain required the precursor L-tryptophan for the synthesis of IAA. Leptolyngbya strain MMG-1 accumulated IAA intracellularly. The IAA secreted by Leptolyngbya strain MMG-1 was significantly correlated with the initial concentration of L-tryptophan in the medium, as well as with the duration of the incubation. The bioactivity of the secreted IAA was determined by its effect on the rooting pattern of Pisum sativum seedlings. The culture supernatant of Leptolyngbya strain MMG-1 stimulated the seedling lateral rooting, while it decreased root length. Hence, rhizospheric Leptolyngbya produced auxin under different conditions and affected the plants rooting pattern. Rev. Biol. Trop. 62 (3): 1251-1260. Epub 2014 September 01.

El género Leptolyngbya comprende cianobacterias filamentosas que son importantes en los campos de cultivo de arroz. En la rizosfera, las cianobacterias producen una variedad de metabolitos secundarios, tales como auxinas, que son importantes en el rendimiento de la agricultura del suelo. La cepa Leptolyngbya MMG-1, fue aislada de la rizosfera de plantas de arroz y se describe en este trabajo. La morfología de esta cepa se estudió por microscopía de luz, así como por microscopía confocal de barrido láser. Además, se estimó la capacidad de esta cepa para sintetizar el compuesto bioactivo auxina como se demostró en diversas condiciones de cultivo (diferentes cantidades de triptófano; pH; diferente luz alterna: períodos oscuros; duración de la incubación). La auxina se extrajo a partir del cultivo de la cepa Leptolyngbya MMG-1 y se identificó como ácido indol-3-acético (AA) por cromatografía de capa fina (TLC), así como por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Nuestros resultados mostraron que la cepa requiere el precursor de L-triptófano para la síntesis de IAA. La cepa Leptolyngbya MMG-1 acumula intracelularmente IAA. El IAA secretada por la cepa Leptolyngbya MMG-1 se correlacionó significativamente con la concentración inicial de L-triptófano en el medio, así como con la duración de la incubación. La bioactividad de la IAA secretada se determinó por su efecto sobre el patrón de enraizamiento de plantas de semillero de Pisum sativum. El sobrenadante del cultivo de la cepa Leptolyngbya MMG-1 estimuló el enraizamiento lateral en la plántula, mientras que se redujo la longitud de la raíz. Por lo tanto, la producción de auxina por Leptolyngbya rizosférica afectó el crecimiento de las plantas.